碘化丙啶染色

碘化丙啶染色

1．原理 碘化丙啶(propidium iodide，PI)不能穿人完整的活细胞膜中，即正常细胞和凋亡细胞在不固定的情况下对PI拒染，而坏死细胞由于失去膜的完整性，PI可进入细胞内与DNA结合，根据此特点，使用PI染色可鉴别死细胞。如果对活细胞染色必须在染色前进行固定，以增加细胞膜对染料的通透性。

2．溶液配制 使用0．01mol／LPBS(pH 7．4)配制终浓度为0．5mg／ml的PI工作液。

3．染色程序

(1)单层细胞培养标本经预冷70％乙醇固定1小时，4℃；

(2)0．01mol／LPBS(pH 7．4)冲洗；

(3)沥干后加入PI工作液，室温孵育15分钟；

(4)冲洗后封片。