固相pH梯度等电聚焦简介
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固相pH梯度等电聚焦是80年代建立起来的一种等电聚焦技术,其所用的介质是一些具有弱酸或弱碱性质的丙稀酰胺衍生物,它们于丙稀酰胺和甲叉双丙稀酰胺有相似的聚合行为。
固定化电解质一端的双键可以在聚合中共价结合到聚丙烯酰胺介质中,其另一端的R集团为弱酸或弱碱,可在聚合物中形成弱酸或弱碱的缓冲体系,利用缓冲体系滴定终点附近一段pH范围就可行成近似线性的pH梯度。
所以固相pH梯度与载体两性电解质pH梯度的区别在于前者的分子不是两性分子,在凝胶聚合时候便形成pH梯度,不随环境电场条件的改变而改变,后者是两性分子,在电场中迁移到自己的等电点后才形成pH梯度。
固相pH梯度等电聚焦比传统等电聚焦具有更高的分辨率,更大的上样量,其分辨率可达到0.001pH,是目前分辨率最高的电泳方法之一。