Tris饱和酚和重蒸酚的区别和配制方法
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Tris饱和苯酚(Tris saturated phenol)也称Tris平衡酚(Tris balanced phenol),是添加了抗氧化剂8-羟基喹啉,tris pH8.0充分平衡的苯酚,呈黄色。常用于DNA抽提和纯化等。
重蒸酚是苯酚在182度蒸馏的组分。
tris配制方法:
1、取出重蒸酚,室温放置68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂。
2、加8-羟基喹啉至0.1%和β-巯基乙醇至0.2%(原液14.4 mol/ml),混匀,溶液呈现黄色,倒入分液漏斗中(也可在烧杯中进行)。
3、加入等溶剂的1 mol/ml的Tris(PH8.0),反复混匀后,静至分层;放出下层黄色酚液,弃上层。
4、加固体Tris约1 g/100 ml酚,摇匀,去水相。
5、加0.1 mol/mlTris(PH 8.0)平衡数次,至PH为8.0。
6、加0.1 mol/mlTris(PH 8.0)于棕色瓶中4度保存。
苯酚重蒸方法:
取苯酚100 g(AR级),铝片0.1 g,NaHCO3 O.05 g,常压蒸馏,收集182℃馏分。