Tris缓冲液(TBS和THB)的配制
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一、TBS的配制
0.05 M TBS ( pH7.4 ) 的配制:
Tris ( 三羟甲基胺基甲烷 ) 12.1g
NaCl 17.5g
加蒸馏水 1500ml
磁性搅拌下滴加浓HCl至pH为7.4,再加蒸馏水至2000ml,即可。
如需含1% Triton X-100,则在滴加HCl前先加入20ml Triton X-100。
二、THB的配制
A液 ( 0.2 M Tris ):( MW 121.14 ) 称取2.428克 Tris,溶于100毫升蒸馏水中。
B液 ( 0.1 N HCl): 取37% HCl ( 比重1:19 ) 0.84毫升,加入蒸馏水中,使成100毫升。
不同pH ( 7.19 ~ 9.10 ) 的0.05 M THB配制:按下表,取A液25ml加B液Xml,补加蒸馏水至100ml。
B=X
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pH
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B=X
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pH
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45.0
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7.19
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25.0
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8.14
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42.5
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7.36
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22.5
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8.23
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41.4
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7.40
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20.0
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8.32
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40.0
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7.54
|
17.5
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8.41
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38.4
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7.60
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15.0
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8.51
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37.5
|
7.66
|
12.5
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8.62
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35.0
|
7.77
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10.0
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8.74
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32.5
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7.87
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7.5
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8.92
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30.0
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7.96
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5.0
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9.10
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27.5
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8.05
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免疫组织化学中,常用pH7.6的THB。