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Tris缓冲液(TBS和THB)的配制

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39072

一、TBS的配制

0.05 M TBS ( pH7.4 ) 的配制:

Tris ( 三羟甲基胺基甲烷 ) 12.1g

NaCl 17.5g

加蒸馏水 1500ml

磁性搅拌下滴加浓HCl至pH为7.4,再加蒸馏水至2000ml,即可。

如需含1% Triton X-100,则在滴加HCl前先加入20ml Triton X-100。

二、THB的配制

A液 ( 0.2 M Tris ):( MW 121.14 ) 称取2.428克 Tris,溶于100毫升蒸馏水中。

B液 ( 0.1 N HCl): 取37% HCl ( 比重1:19 ) 0.84毫升,加入蒸馏水中,使成100毫升。

不同pH ( 7.19 ~ 9.10 ) 的0.05 M THB配制:按下表,取A液25ml加B液Xml,补加蒸馏水至100ml。

B=X
pH
B=X
pH
45.0
7.19
25.0
8.14
42.5
7.36
22.5
8.23
41.4
7.40
20.0
8.32
40.0
7.54
17.5
8.41
38.4
7.60
15.0
8.51
37.5
7.66
12.5
8.62
35.0
7.77
10.0
8.74
32.5
7.87
7.5
8.92
30.0
7.96
5.0
9.10
27.5
8.05

免疫组织化学中,常用pH7.6的THB。

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