丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册
点赞
收藏
wx-share
分享

在Tris-Tricine缓冲系统中电泳

相关实验:反转录病毒原液检测实验

最新修订时间:

材料与仪器

蛋白质
Tricine样品缓冲液 考马斯亮蓝染色液 乙酸
电泳仪 离心机

步骤

1.  按“Laemmli凝胶电泳法”的步骤1~7,配制溶液并灌制分离胶和积层胶。
 
2.  制备样品,但采用2×Tricine的样品缓冲液,加样前样品于40℃处理30〜60 -11。多肽分子量标准混合物用作多肽分离的对照。

3.  组装电源装置并加样。但加样孔是以Tricine阴极缓冲液或水加以冲洗并以之充满;在电泳装置的下缓冲液槽加入阳极缓冲液,上缓冲液槽加入阴极缓冲液。

4.  连接电源,在30 V 恒压下电泳1 h 后,接着在150 V 恒压下电泳4 h。使用热交换装置使电泳缓冲液槽温度维持室温水平。

5.  当考马斯亮蓝G-250示踪染料到达凝胶的底部时,将电压调回零并断开电源。

6.  取出凝胶,在考马斯亮蓝G-250染色液中染色2 h,接着在10%乙酸水溶液中脱色,每隔30 min 换液1次,直至背景干净为止,需要更高检测敏感度时,推荐采用银染的方法。

来源:丁香实验

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序