L929培养过程中的异常形态问题

问：复苏后的L929培养第三天出现如图所示的情况，细胞形态不好，而且看上去细胞底层有层模糊的东西，电镜下观察有成块的黑点出现。是什么原因呢？另：培养液偏碱。

答：细胞看上去处于亚健康状态：

1、可能由于培养瓶不干净，而造成细胞底层模糊，而造成的污染；

2、成块的黑点出现可能由于刚复苏出来的细胞部分死亡而聚集成的死细胞团；

3、可能由于细胞在冻存时或是复苏时发生了污染，例如培养基的污染，胰酶的污染，传代等操作不当造成的污染；

4、可能细胞刚刚复苏比较脆弱，而且也可能由于肿瘤细胞传代不当致使细胞发生老化，引起细胞生长状态不良。

建议培养基加抗生素再培养观察一段时间。