试剂配方:RNA操作试剂
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Stock Solution:
1M NaAc(PH7.0): 82g NaAc 先加一定量ddH2O,用NaOH调PH值至7.0,再用ddH 2 O定容至1L,灭菌
0.5M EDTA (PH8.0): 186.1g EDTA 先加一定量ddH 2 O, 用NaOH调PH值至8.0,再用ddH 2 O定容至1L,灭菌
10×MOPS buffer: (用DEPC水配,再灭菌)
MOPS 41.85g
1M NaAc(PH7.0) 50ml
0.5M EDTA(PH8.0) 20ml
先加一定量DEPC水,再用4N NaOH 调PH 至7.0(约加7ml),再用DEPC水定容至1L,灭菌
1M NaH 2 PO 4 buffer ( PH7.2):
NaH 2 PO 4 71g
H 3 PO 4 (85%) 4ml
用灭菌的DEPC水定容至1L
20×SSC :
NaCl 175.3g
Na 3 Citrate 88.2g
用ddH 2 O定容至1L,灭菌
10% SDS :
SDS 100.0g
用灭菌的ddH 2 O定容至1L(将水加热到68℃有助于溶解)
Work Solution
Sample buffer :
Deionized formamide 1000 ml
10× MOPS buffer 200 ml
37% formaldehyde 320 ml
Blue juice(loading buffer):
Glycerol 70ml
5×TBE 10ml
10%SDS 2ml
0.5M EDTA(PH8.0) 4ml
Bromphenol Blue 0.5g
Xylene Cyanol 0.5g
加灭菌的ddH2O定容至100ml
Hybridization buffer:
1M NaH 2 PO 4 buffer 500ml
0.5M EDTA(PH8.0) 2ml
10% SDS 70g
BSA 10g
用灭菌的DEPC水定容至1L,贮存于室温下
洗膜液Ⅰ:(for 1 littre)
20×SSC 100ml
10%SDS 10ml
洗膜液Ⅱ:(for 1 littre)
20×SSC 25ml
10%SDS 10ml
洗膜液Ⅲ:(for 1 littre)
20×SSC 5ml
10%SDS 10ml
4×SSC:
20×SSC 200ml
用灭菌的DEPC水定容至1L
2×SSC:
20×SSC 100ml
用灭菌的ddH 2 O定容至1L
1M NaAc(PH7.0): 82g NaAc 先加一定量ddH2O,用NaOH调PH值至7.0,再用ddH 2 O定容至1L,灭菌
0.5M EDTA (PH8.0): 186.1g EDTA 先加一定量ddH 2 O, 用NaOH调PH值至8.0,再用ddH 2 O定容至1L,灭菌
10×MOPS buffer: (用DEPC水配,再灭菌)
MOPS 41.85g
1M NaAc(PH7.0) 50ml
0.5M EDTA(PH8.0) 20ml
先加一定量DEPC水,再用4N NaOH 调PH 至7.0(约加7ml),再用DEPC水定容至1L,灭菌
1M NaH 2 PO 4 buffer ( PH7.2):
NaH 2 PO 4 71g
H 3 PO 4 (85%) 4ml
用灭菌的DEPC水定容至1L
20×SSC :
NaCl 175.3g
Na 3 Citrate 88.2g
用ddH 2 O定容至1L,灭菌
10% SDS :
SDS 100.0g
用灭菌的ddH 2 O定容至1L(将水加热到68℃有助于溶解)
Work Solution
Sample buffer :
Deionized formamide 1000 ml
10× MOPS buffer 200 ml
37% formaldehyde 320 ml
Blue juice(loading buffer):
Glycerol 70ml
5×TBE 10ml
10%SDS 2ml
0.5M EDTA(PH8.0) 4ml
Bromphenol Blue 0.5g
Xylene Cyanol 0.5g
加灭菌的ddH2O定容至100ml
Hybridization buffer:
1M NaH 2 PO 4 buffer 500ml
0.5M EDTA(PH8.0) 2ml
10% SDS 70g
BSA 10g
用灭菌的DEPC水定容至1L,贮存于室温下
洗膜液Ⅰ:(for 1 littre)
20×SSC 100ml
10%SDS 10ml
洗膜液Ⅱ:(for 1 littre)
20×SSC 25ml
10%SDS 10ml
洗膜液Ⅲ:(for 1 littre)
20×SSC 5ml
10%SDS 10ml
4×SSC:
20×SSC 200ml
用灭菌的DEPC水定容至1L
2×SSC:
20×SSC 100ml
用灭菌的ddH 2 O定容至1L