筛选多肽的试剂及配制
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筛选多肽的试剂及配制
LB培养基：
胰蛋白胨 10g；
酵母提取物：5g；
NaCl：5g
溶于去离子水，至1L，高压灭菌，室温保存。
IPTG/Xgal：
称取1.25g IPTG，1.0g Xgal，溶于二甲基甲酰胺，至总体积25ml，-20℃避光保存。
LB/IPTG/Xgal平板：
1L LB培养基+15g琼脂粉，高压灭菌，冷却至70℃以下，加入1ml IPTG/Xgal，立即铺板，4℃避光保存。
顶层琼脂糖凝胶：
胰蛋白胨 10g
酵母提取物5g
NaCl 5g
MgCl・6H2O 1g
琼脂糖7g
溶于适量去离子水中，至总体积为1L。高压灭菌，分装为50ml/份，室温保存，使用时于微波炉内融化。
2´M9盐：
Na2HPO4 12g
KH2PO4 6g
NaCl 1g
NH4Cl 2g
溶于适量去离子水中，至终体积为1L。
小型平板：
500ml 2´M9盐
500ml 3%琼脂粉
20ml 20%葡萄糖
2ml 1M MgSO4
0.1ml 1M CaCl2
1ml 硫胺素（10mg/ml）
在混合之前，将上述成分分别高压灭菌并冷却至70℃以下，葡萄糖和硫胺素采用过滤除菌。平板储存于4℃。
封闭缓冲液：
0.1M NaHCO3（pH 8.6）
5mg/ml BSA
0.02%NaN3
过滤除菌，储存于4℃。
TBS：
50mM Tris-HCl（pH 7.5）
150mM NaCl
高压灭菌，室温储存。
PEG/NaCl：
20%（w/v）聚乙醇-8000
2.5M NaCl
高压灭菌，室温储存。
碘化物缓冲液：
10mM Tris-HCl（pH 8.0）
1mM EDTA
4M NaCl
室温避光保存。
链亲和素储存液：
称取1.5mg 冻干链菌素溶于1ml的10mM 磷酸钠（pH 7.2），100mM NaCl，0.02%NaN3溶液。贮存于4℃或-20℃，避免反复冻融。
