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基因拼接SOE法

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  1989年,Horton等人提出了SOE法(Gene splicing by over lap extension),即通 过复制时DNA链的交错延伸不实现基因拼接,分四步进行。
  (1)引物设计:引物a和d是常规引物;b的左半段为常规引物,右半段为基因Ⅱ的引 物序列;c同理;则b和c的部分碱基可互补配对。
  (2)基因I、Ⅱ分别扩增,产物相应为片段A、B和C、D。
  (3)两种产物混合,经变性及退火处理,A链和D链部分碱基互补配对,成杂交链。
  (4)在DNApolymeraseI作用下,A和D链互为引物和模板,合成出A'D'链,即为基因I 和基因Ⅱ的接接产物。若在引物中引入突变的碱基序列,则在接接产物中,将按预先 设计要求出现定点突变。

 

 

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