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直接从临床血液样本精准分选细胞

美天旎

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血液制品由于包含大量红细胞,给白细胞亚群的分离带来了不小的障碍。常见的实验方法均需要从血液样品中分离 PBMC (外周血单个核细胞)后,进一步获取目的白细胞类群。不仅时间成本巨大,且效率、纯度、得率及细胞活力等核心指标,均对下游研究带来不同影响。下图概述了 PBMC 中各种白细胞的比例。

美天旎StraightFrom®全血磁珠系列基于细胞磁性分选金标准的 MACS 技术, 具备常规 MACS 分选磁珠所有优势的同时,更支持以全血及各种血液制品作为初始样品,快速精准高效分离目的细胞,为临床样本研究提供支持。针对不同血液样品内的组分及浓度不同提供多种StraightFrom 磁珠,可实现无需密度梯度离心,从血液样品直接高效分选高纯度、高活力的目的细胞亚群,如常见的 CD4+、CD8+、CD14+、CD19+ 及 CD56+等。

用于研究的起始血液样品有哪些类型?

以下是常用于分离研究白细胞亚群的初始血液样品及其特性:

1. 全血

全血献血所得样本是一种方便可得且细胞数量恒定,体积灵活可控的血液起始样品。全血作为血液来源的优点是样本新鲜,这对研究中性粒细胞等敏感细胞至关重要。抗凝剂通常用于血液样本中,以防止血液凝结。多种下游应用都需要从抗凝后的全血样品中分离白细胞亚群后进行。所有的主要免疫细胞都可以在最自然的条件下在新鲜抽取的外周血中找到。

对应磁珠:StraightFrom Whole Blood MicroBeads

适配分选器:MidiMACS™、Quadro-MACS™、autoMACS® NEO和MultiMACS™ Cell Separator 系列

2. Buffy coat(常译作白膜层细胞)

作为全血献血后的副产品,buffy coat 是血液样品中除去红细胞和血浆后含有白细胞的部分。buffy coat 内白细胞含量与初始全血样品相同,但浓度更高,是获取高浓度富集 PBMC 的理想初始样品。

对应磁珠:StraightFrom Buffy Coat MicroBeads

适配分选器:QuadroMACS、autoMACS NEO和MultiMACS Cell Separator 系列

3. Leukopak®

在白细胞单采术时,白细胞将被从全血中得到分离并收集为高浓度白细胞样品,商品化后称为 Leukopaks®。 因此,可作为分离大量 PBMC 的理想起始样品。

对应磁珠:StraightFrom Leukopak® MicroBeads

适配分选器:MultiMACS Cell Separator 系列

4. LRSC(Leukoreduction system chamber)

LRSC 也称为 buffy cone,用于常规血小板单采程序,以去除不需要的白细胞。 在分离血小板过程中,不需要的白细胞将被过滤入 LRSC 容器中,因而具有小体积但白细胞密度极高的特点,是分离白细胞的理想起始材料。

对应磁珠:StraightFrom LRSC MicroBeads

适配分选器:QuadroMACS、MultiMACS Cell Separator 系列

为什么基于分选柱的 MACS 磁性分选是细胞分离的理想选择?

  • MACS 分选柱的优势

MACS 分选柱作为 MACS 磁性分选技术的核心部分,内部填充专利的超顺磁铁珠,可将磁力放大 10000 倍。高倍扩大磁力的优势在于:

1. 细胞只需要极微量的磁力标记就可以滞留于磁场中,从而实现分离;

2. 细胞可以自由流出,过程极温和,特别适合如单细胞测序等对细胞状态灵敏的检测;

3. 通过调节样品加载至分选柱的流速,实现细胞纯度和得率的精细调节。

  • 纳米磁珠的优势

1. 最少量的磁性标记,确保细胞的完整性和生物学特性不受影响;

2. 保留大量游离的同种表位可用于下游鉴定分析;

3. 使用去除分选策略时,保证目的细胞表面无非特异性标记,做到真正 untouched 细胞分选;

4. 高特异性,在使用 StraightFrom 全血磁珠时,可直接从全血中分离目的细胞;

5. 安全可靠方便向临床引用转化,基于 MACS 技术的 CliniMACS CD34 试剂系统,已通过美国 FDA 认证许可。  采用有柱式分离系统并使用 MACS  磁珠标记后的细胞(A)和采用无柱式分离体系使用磁珠标记后的细胞(B)在扫描电镜下的外观。

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