经验分享｜动物活体光学成像实验——底物的注射方式

目前，在荧光素底物中，D-荧光素和腔肠素使用得比较多。不同的底物应采用不同的注射方式。D-荧光素可通过尾静脉注射（IV）或腹腔注射（IP）。然而，腔肠素因其会被血液中的氧气氧化，产生较高的背景荧光，所以只能通过 IV 的方式注射到实验动物体内。

对于 D-荧光素来讲，IV 和 IP 同样会影响生物发光的结果。

IV 与 IP 比较结果图

(Keyaerts M, Verschueren J, Bos TJ, et al.. Dynamic bioluminescence imaging for quantitative tumour burden assessment using IV or IP administration of D: -luciferin: effect on intensity, time kinetics and repeatability of photon emission. Eur J Nucl Med Mol Imaging. 2008 May;35(5):999-1007.)

左图为在同一只小鼠上尾静脉注射和腹腔注射 D-荧光素后的生物发光图像。右图为不同注射方式后的发光动力学曲线。尾静脉注射在 5min 左右达到峰值，腹腔注射在 10-20 分钟达到峰值。与腹腔注射相比，尾静脉注射后达到峰值的时间明显缩短，最大光子发射量也平均高 5-7 倍。此外，动力学曲线显示尾静脉注射后，很快观察到峰值，随后迅速下降。腹腔注射后，测量峰值较迟出现，然后更缓慢地降低。

从上述生物发光活体成像实验，可总结出腹腔注射和尾静脉注射的优缺点：

综上所述，D-荧光素的给药方式，推荐腹腔注射；腔肠素的剂药方式，推荐尾静脉注射。