实验12 红细胞比容的测定
互联网
实验12 红细胞比容的测定
【目的要求】
学习测定红细胞比容的方法。
【基本原理】
从血管中抽出血液,放入加有抗凝剂的玻璃管中混匀,经离心沉淀后,管中的血液分为两层:上层是淡黄色的透明液体——血浆;下层是挤压得很紧的呈暗红色的红细胞。红细胞在血液中所占的容积百分比,称为红细胞比容。健康成年人的红细胞比容约为40—50%。严重贫血时可下降至15%,红细胞增多症患者则上升到70%。
【实验器材】
刺血针、离心机、酒精棉球、草酸盐抗凝剂。
【方法与步骤】
1.配制抗凝剂测定红细胞比容需注意选择抗凝剂,一般采用草酸盐抗凝剂,其配制方法如下:草酸铵1.2g、草酸钾0.8g、40%甲醛溶液(防止霉菌生长)1ml、加蒸馏水至100ml。将抗凝剂溶液0.1ml吸入毛细管中,待溶液水分自然蒸发或稍加温烘干后使用。
2.一般使用刺血针(图3-1)采血。使用时,先旋转螺旋鞘,调节针刃长度约2—3mm,用酒精棉球消毒刺血针针刃。再将另一端的拉手拉出,用侧面的闭锁机将其固定,外露的针刃亦被拉入螺旋鞘内,这时即可使用。
通常多用耳垂边缘或左手无名指指端部位采血。采血前,先用酒精棉球擦拭采血部位,进行消毒。待酒精挥发后,即可将准备好的刺血针的螺旋鞘尖端紧压采血部位,迅速以拇指按动闭锁机,针刃即可借弹簧的力量射出,刺破皮肤。注意:不要用力挤压,让血液自动流出。用干棉球将第一滴血擦去,待第二滴血流出较多时,以一经抗凝剂处理的毛细管末端接触血滴,握管于水平位置,让血液流入管内,直至充满管的3/4。
3.用密封剂把毛细管的一端封住,形成一塞子,然后将毛细管的塞子向上放入离心机中,调节离心机的转速为3000转/min,离心5min。
4.离心后,测定红细胞柱的高度(mm)及细胞加血浆的高度,然后按下面公式计算比容,并填入实验报告。