实验14 红细胞的溶解——溶血作用

 

实验14 红细胞的溶解——溶血作用

 

　　【目的要求】

　　1．学习引起红细胞溶解的各种实验方法。

　　2．观察红细胞的溶血现象。

　　【基本原理】

　　红细胞在高渗NaCl溶液中，会失去水分发生皱缩；在低渗NaCl溶液中，会因过多水分进入红细胞而膨胀，甚至破裂，使血红蛋白释出，称为红细胞溶解。红细胞对低渗溶液具有不同的抵抗力，即红细胞具有不同的脆性，对低渗溶液抵抗力小，表示红细胞的脆性大，对低渗溶液抵抗力大，则表示红细胞的脆性小。

　　各种有机溶剂、酸、碱等都会使红细胞的膜发生溶解，称为红细胞的化学性溶血。

 

　　一、渗透性溶血——红细胞渗透脆性的测定

 

　　【动物与器材】

　　兔、3%红细胞混悬液、离心机、2ml注射器、5ml试管10支、5ml吸管3支、试管架、滴管、洗耳球、3.8%柠檬酸钠、1%和2%NaCl溶液。

　　【方法与步骤】

　　1.3%红细胞混悬液的制备取兔血2ml，加入盛有3.8%柠檬酸钠溶液0.2ml的离心管中，混合，放入离心机中，转速3000转/min，离心5分钟。取出后，弃去上清液，加入生理盐水混合后再离心，然后除去上清液。同法重复一次，即得洗涤之红细胞。用生理盐水配成3%混悬液备用。

　　2．取试管10支，从1—10分别标记后，排列在试管架上，按表3－1配制各种浓度的NaCl溶液。

　　表3－110支试管中分别盛各种浓度的Nacl溶液

 

　　3．每支试管放入兔3%红细胞混悬液1—2滴，摇匀，静置半小时后即可观察各试管之溶血现象。

　　4．管内液体变红而透明者，称完全溶血。记录开始完全溶血管之溶液浓度，这代表红细胞的最高抵抗力，即最小脆性，正常为0.35—0.30%NaCl溶液，通常以这个数值表示红细胞的渗透脆性。

　　5．管内液体混浊，上层带红色者，称不完全溶血。记录开始不完全溶血管之溶液浓度，这代表红细胞的最低抵抗力，即最大脆性，正常约为0.45%NaCl溶液。

　　6．管内液体分两层，上层浅黄色透明，下层红色不透明者，称不溶血。

 

　　二、化学性溶血

 

　　【动物与器材】

　　兔、3%红细胞混悬液、5ml试管4支、2ml吸管5支、0.9%NaCl、0.1mol/LHCl、0.1mol/LNaOH、乙醚或氯仿。

　　【方法与步骤】

　　1．取试管4支，各盛兔3%红细胞混悬液2ml，分别加入下列溶液中，并观察红细胞在各试管中的溶解现象。

　　(1)0.9%NaCl 1ml

　　(2)乙醚或氯仿 0.2ml

　　(3)0.1mol/LHCl 1ml

　　(4)0.1mol/LNaOH 1ml

　　2．半小时后、观察各试管之溶血情形，颜色、透明度。分别记录并解释产生溶血的机理。