实验2 动物的细胞和组织

实验2 动物的细胞和组织

　　一、目的

　　（一）了解细胞的基本结构及有丝分裂各期的特点。

　　（二）了解动物的4类基本组织的结构和功能。

　　二、内容

　　（一）细胞：人口腔上皮细胞；马蛔虫或其他动物细胞的有丝分裂制片。

　　（二）上皮组织：复层扁平上皮。

　　（三）结缔组织：疏松结缔组织；透明软骨、蛙的血液装片。

　　（四）肌肉组织：横纹肌、平滑肌。

　　（五）神经组织：脊髓的前角细胞。

　　三、实验材料和用具

　　人口腔上皮、疏松结缔组织及血液组织（活蛙或蟾蜍）、横纹肌（蝗虫浸制标本）、有丝分裂制片、复层扁平上皮、透明软骨、平滑肌及神经组织4种组织的切片。幻灯机、载玻片、盖玻片、解剖器、吸管、吸水纸、牙签、0．1％及1％的亚甲蓝、0．7％及0．9％的NaCl溶液、蒸馏水。

　　四、实验操作及观察

　　做口腔上皮细胞临时装片时，注意必须将从颊部刮下的细胞在载玻片上涂得薄而均匀。滴加0．9％NaCl液不宜过多，恰在盖玻片之下为宜。

　　做疏松结缔组织装片时，用解剖针取下的组织必须在一小滴生理盐水中将其展开成薄片。

　　做横纹肌装片时，将取下的一小束肌肉放在载玻片上加一滴水，必须在水中用解剖针顺着肌纤维仔细分离，分得越细越好。

　　（一）人口腔上皮细胞：用牙签粗的一端，放在自己的口腔里，轻轻地在口腔颊内刮几下（注意不要用力过猛，以免损伤颊部）。将刮下的白色粘性物薄而均匀地涂在载玻片上，加一滴0．9％NaCl溶液，然后加盖玻片，在低倍显微镜下观察。口腔上皮细胞常数个连在一起。由于口腔上皮细胞薄而透明，因此光线需要暗些。找到口腔上皮细胞后，将其放在视野中心，再转高倍镜观察。口腔上皮细胞呈扁平多边形。试辨认细胞核、细胞质、细胞膜。若观察不清楚时，可在盖片一侧加一滴0．1％的亚甲蓝，另一侧放一小块吸水纸。如此，可使染液流入盖片下面，将细胞染成浅蓝色。核染色较深。注意染液不可加得过多，以免妨碍观察。

　　（二）疏松结缔组织：取活蛙或蟾蜍经麻醉或处死后，剪开腹部的皮肤，用细镊子从皮肤与肌肉层之间取下一小片结缔组织（两栖类的皮下结缔组织不发达）。放在干净的载玻片上，加一滴0．7％NaCl溶液。用解剖针将其展薄，加数滴l％亚甲蓝。2min后，用0．7％NaCl溶液冲去多余染液。加盖玻片在镜下观察。

　　可见胶原纤维和弹性纤维均不着色。胶原纤维成束，弯曲成波浪状；弹性纤维细而具分枝，不成束，无波浪状弯曲。结缔组织细胞不甚规则，核着色深而清楚，细胞质色浅能辨认出细胞界限。

　　（三）血液组织：

　　1．解剖蛙或蟾蜍，以吸管从心脏（最好在动脉圆锥处）取出血液，放一小器皿中，加入少许0．7％NaCl溶液稀释。吸此液一滴，制成临时装片，在镜下观察。

　　2．蛙的红细胞呈扁椭圆形。单个红细胞呈极浅的黄色，中央有一较大的椭圆形细胞核。红血细胞间的无色液体称为血浆（实际已被稀释）。轻轻地敲击载片，可看到血细胞在血浆中转动，注意观察红细胞的侧面是什么形状。

　　思考血液为何呈红色？有何功用？

　　（四）肌肉组织：

　　1．从保存的蝗虫浸制标本胸部用细镊子取下一小束肌肉，放载玻片上加1～2滴水，用解剖针仔细分离（越细越好），加盖玻片置于镜下观察。

　　2．蝗虫的肌肉为横纹肌，肌肉组织由长形的肌纤维组成。外面有一层薄膜叫肌膜。细胞中与其长轴平行排列着许多细丝状物，此为肌原纤维。肌原纤维有明暗相间的横纹，为什么？可在高倍镜下详细观察。在细胞膜下面分布有许多椭圆形的细胞核，故横纹肌为多核的合胞体。若观察不够清楚时，可用0．1％亚甲基蓝染色。

　　五、示范

　　（一）细胞的有丝分裂；在各示范切片中应辨认出染色体、中心粒及纺锤体。注意分裂各期的特点。

　　前期：染色体出现，着色较深。中心粒已分裂为二，向两极移动，形成纺锤体。在前期结束时，核仁及核膜消失。

　　中期：染色体排列在细胞赤道面上，中心粒已达两极，此时纺锤体最大。染色体数目很清楚。

　　后期：各染色体已纵裂为二，分别向两极移动。细胞已开始分裂，细胞的中部出现凹陷。

　　末期：细胞分裂为二，染色体消失，重新组成的核出现。

　　（二）上皮组织（复层扁平上皮）：取食道横切片，用低倍镜找到上皮，转高倍镜观察。基层为排列整齐的一层柱状细胞，最外层为多层扁平细胞。

　　（三）软骨组织：观察透明软骨的染色切片，可见大部底质被染成相同的均匀颜色，此即为软骨基质，基质中有许多圆形或卵圆形的窝，称为胞窝，常常2个或4个并列在一起。胞窝内有软骨细胞，细胞核染成深色，细胞膜界限很清楚，细胞质染色极浅，不太清楚。

　　（四）肌肉组织（平滑肌）：取猫胃的横切片，在低倍镜下观察，肠壁被染成粉红色的部分为肌肉层，将光线调节略暗些，可见肌肉是由很多细梭形的细胞所组成，此即为平滑肌细胞，核呈椭圆形，被染成蓝紫色。

　　（五）神经组织：观察牛脊髓涂片。找到有细胞处，则可见细胞被染成淡蓝色，细胞体形状不规则。细胞核位于中央，色浅，核仁着色较深。能看到细胞突起，树突的基部较粗，而轴突则粗细均匀，涂片上不易看到。（六）观看幻灯片：动物细胞的电子显微照片，示细胞膜、细胞核（核膜、核仁、染色质丝）、内质网、高尔基器、线粒体、溶酶体、中心粒等以及细胞分裂。有条件的可看细胞分裂电影。（这部分也可在自习时间作）

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