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肌组织培养

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各种肌组织均可用于培养,以心肌和骨骼肌较实用。
(-)骨骼肌细胞培养
1 、出生 1 2 天的乳鼠,引颈处死。
2 、无菌取大腿肌组织,切成 0.3 0.5cm2 小块后,用不含钙镁离子的 Hanks 液配的 0.25% 胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过。
3 、计数调整细胞密度。
4 、快接种量 2 × 106 / 皿入培养基培养。
5 、培养基内含 10% 小牛血清,可加 1% 的胎汁以促进分化。
接种在胶原或胶原的底物上能促进细胞分化,明胶配置:用 Hanks 液配成 0.01% 明胶。
该细胞接种率约 50% ,细胞生长开始呈纺锤形,培养 50 52 小时后出现融合形成肌细胞状多核纤维。数日后融合停止,此时可观察到横纹,一般在融合后二、三天内能见到收缩现象。
(二)心肌细胞培养
心肌细胞是最早的培养材料, Carrel 曾长期培养过心肌组织,至今心肌仍不失为好的培养物,最常用的是鸡胚心肌。
心肌比较容易培养和生长,可用悬滴培养、组织块培养和消化培养法,均可获良好的效果。取心室肌培养较好,原代培养的鸡胚心肌呈纺锤形,培养成功时,一周后可见节律性收缩现象。

 

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