反向遗传学 reverse genetics

反向遗传学是相对于经典遗传学而言的。经典遗传学是从生物的性状、表型到遗传物质来研究生命的发生与发展规律。反向遗传学则是在获得生物体基因组全部序列的基础上，通过对靶基因进行必要的加工和修饰，如定点突变、基因插入\缺失、基因置换等，再按组成顺序构建含生物体必需元件的修饰基因组，让其装配出具有生命活性的个体，研究生物体基因组的结构与功能，以及这些修饰可能对生物体的表型、性状有何种影响等方面的内容。与之相关的研究技术称为反向遗传学技术。

 

注： RNA 病毒的反向遗传学 , 是采用病毒的遗传材料 , 在培养细胞或易感宿主中重新拯救出活病毒或类似病毒物质。能够拯救病毒的遗传材料称为感染性克隆 , 一般是在细菌质粒中含有整个病毒基因组的 cDNA 拷贝 , 使得 cDNA 本身或从 cDNA 体外转录所得的 RNA 具有感染性。 RNA 病毒的反向遗传系统通过定向修饰病毒的基因组序列 , 检测被拯救的人工改造病毒的表型 , 可以在体内 (in vivo) 有效地研究病毒基因结构、功能和病毒 - 宿主相互作用。自 1978 年第一例 RNA 病毒 Q β噬菌体的成功拯救以来 , 各类 RNA 病毒的分子生物学研究取得了长足的进展 , 这主要归功于各种 RNA 病毒反向遗传系统的建立和发展。该技术的核心是首先构建 RNA 病毒的全长 cDNA 分子，并使之受控于 RNA 聚合酶启动子，通过体外转录过程再次得到病毒 RNA ，然后将该转录物 RAN 转染哺乳动物细胞可拯救到活病毒，由于这种拯救病毒是来自全长 cDNA 分子 , 因此可以在 DNA 水平上对病毒基因组进行各种修饰或改造 , 然后通过拯救病毒的表性变化来判断这些基因操作的效果 , 从而达到对病毒基因组表达调控机制 , 病毒致病的分子机理等进行研究的目的 , 甚至还可以得到减毒毒株，开发新型的疫苗。目前已有许多 RNA 病毒的全长感染性 cDNA 克隆构建成功。