酵母菌子囊孢子的观察

实验十五 酵母菌子囊孢子的观察

　　一、目的要求

　　学习并掌握酵母菌子囊孢子（ascospore）的观察方法。

　　二、基本原理

　　酵母菌的子囊孢子生成与否及其形状，是酵母分类上的重要依据。一部分酵母菌只有当它在最适条件下，才能观察到形成的子囊孢子，不同种属的酵母菌，形成子囊孢子的条件不同。葡萄糖-醋酸盐培养基特别有利于酿酒酵母子囊孢子的形成。本实验用生长在此培养基上的酿酒酵母为材料，进行子囊孢子的观察。

　　三、器材

　　酿酒酵母；

　　吕氏碱性美蓝染液，石炭酸复红染液，3％的酸性酒精，孔雀绿芽孢染液，麦芽汁琼脂斜面培养基，葡萄糖-醋酸盐培养基等。

　　四、操作步骤

　　1．将酿酒酵母先移种到新鲜麦芽汁琼脂斜面上，25℃培养24小时左右。如此活化二次后，备用。

　　2．用接种环取活化后的培养物，接种到葡萄糖-醋酸盐斜面上，25℃培养二周左右。

　　3．用接种环挑取少许生长在葡萄糖-醋酸盐培养基上的酿酒酵母于载玻片上，制成涂片，干燥、固定。

　　4．用两种方法进行染色。一种方法是加石炭酸复红染液于固定涂片处，在火焰上加热5—10分钟（不能沸腾），用酸性酒精冲洗30—60秒钟，再用水洗去酒精，加吕氏碱性美蓝染液数滴，数秒钟后用水洗去，水干后置显微镜下观察，结果孢子为赤色，菌体为青色；另一种方法是用孔雀绿芽孢染液进行染色，但无需加热，干后置油镜下观察子囊孢子。

　　五、实验报告

　　绘出酵母菌子囊孢子形态图。