【推荐】酵母菌的培养和观察实验方法与步骤

互联网2013-09-06

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目的认识酵母菌的形态特征，了解培养酵母菌的方法。

实验前的思考人类认识和利用酵母菌的历史悠久，早在史前时期，先人们就学会酿酒。约在6000年前，就发明发面的方法。直到十九世纪有了显微镜，人们才窥探到醉母菌的真面目。对酵母菌做纯系培养分类研究的是与巴斯德同时代的丹麦人汉斯，他是为寻求酿造高品质啤酒的途径才去深入研究酵母菌的。

材料器具 甜酒酿汁液，新鲜酵母，豆芽;显微镜，载玻片，盖玻皮，玻璃棒，镊子，滴管，吸水纸，酒精灯，石棉网，火柴，漏斗架，玻璃斗，量杯，三角烧瓶，烧杯，天平，量筒，棉絮;蔗糖，乳酸，碘液。

步骤

1.观察酵母菌

(1)用滴管从甜酒酿的汁液中吸取一滴汁液，滴在载玻片上，用针摊开，盖上盖玻片，在低倍镜下就能清楚地看到甜酒酿的汁液中悬浮着无数酵母菌。再换高倍镜仔细观察一个酵母菌，可以看到酵母菌是椭圆形的单个细胞，细胞中有许多小颗粒，也有几个大的液泡(图示)。有的酵母菌的一端长出大小不同的突起，这是酵母菌的芽体。芽体成长脱落，就成为新的个体，有的芽体在从母体脱落前又长出突起。这种繁殖方法叫出芽繁殖。

(2)在盖玻片一边加一滴碘液，从另一边用吸水纸把染液引入盖玻片下。不久就能看到被染成棕褐色的细胞核和变成蓝紫色的淀粉粒。

2.培养酵母菌

(1)用蔗糖液培养在盛有100毫升的三角烧瓶里加5克蔗糖，煮沸。等到溶液稍稍冷却，加一小块鲜酵母，用玻璃棒搅拌均匀;再用棉絮塞紧瓶口。然后把烧瓶放在 25～30℃的温暖地方，数小时后就可见到溶液里有气泡产生，并散发出酒味。这是因为酵母菌正在把糖分解成乙醇和二氧化碳。

(2)二三天后吸取溶液在显微镜下观察，就可看到已培养出大量酵母菌。

注意事项

1.观察酵母菌时，视野里杂质较多，有淀粉粒、半分解的淀粉团块、曲霉孢子和其他杂菌等等，只要掌握住酵母菌的形状和体内具有液泡，尤其是染色后体内具有褐色的核和蓝色的淀粉粒这些特点，就可以跟其他杂菌区分开来。

2.发酵在缺氧的环境里仍能良好地进行，不必为了增加氧气去搅拌已放入菌种的培养液。

分析和讨论

酵母菌是少数能在缺氧环境里生存较长时间的一种微生物，它属于兼性菌类。在一般情况下进行有氧呼吸。如环境中有丰富的糖类，它进行缺氧呼吸。其过程如下：

1.C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O+2.87×103兆焦(有氧呼吸)

2.C6H12O6→2CO2+2C2H5OH+109×103兆焦(缺氧呼吸)

建议培养酵母菌还可以采用下列两种方法。

1.用乳酸、豆芽汁和蔗糖液培养

(1)取10克豆芽放入100毫升水中，加热煮沸半小时，盛起，用细布过滤。在滤液里加5克蔗糖和5毫升乳酸，配成液体培养液。

(2)把鲜酵母半块或老面(发酵后晾干的面粉团)打碎，投入培养液中，放在黑暗温暖的地方，二三天后就可以培养出大量酵母菌。

2.用巴斯德培养液培养

酵母菌需要的无机营养来自外界环境。如果在培养液内适当增加氮、磷等元素，效果会更好。巴斯德培养液的配方如下：

蔗糖15克，碳酸铵1克，磷酸氢钾0.2克，磷酸钙0.02克，硫酸镁0.02克，蒸馏水100毫升，培养方法跟上述的相同。