原理
酵母菌的子囊孢子生成与否及其形状，是酵母分类上的重要依据。一部分酵母菌只有当它在最适条件下，才能观察到形成的子囊孢子，不同种属的酵母菌，形成子囊孢子的条件不同。葡萄糖-醋酸盐培养基特别有利于酿酒酵母子囊孢子的形成。本实验用生长在此培养基上的酿酒酵母为材料，进行子囊孢子的观察。
材料与仪器
酿酒酵母
吕氏碱性美蓝染液 石炭酸复红染液 酒精 孔雀绿芽孢染液 麦芽汁琼脂斜面培养基 葡萄糖-醋酸盐培养基
培养箱 载玻片
吕氏碱性美蓝染液 石炭酸复红染液 酒精 孔雀绿芽孢染液 麦芽汁琼脂斜面培养基 葡萄糖-醋酸盐培养基
培养箱 载玻片
步骤
1. 将酿酒酵母先移种到新鲜麦芽汁琼脂斜面上，25℃培养24小时左右。如此活化二次后，备用。
2. 用接种环取活化后的培养物，接种到葡萄糖-醋酸盐斜面上，25℃培养二周左右。
3. 用接种环挑取少许生长在葡萄糖-醋酸盐培养基上的酿酒酵母于载玻片上，制成涂片，干燥、固定。
4. 用两种方法进行染色。一种方法是加石炭酸复红染液于固定涂片处，在火焰上加热5~10分钟（不能沸腾），用酸性酒精冲洗30~60秒钟，再用水洗去酒精，加吕氏碱性美蓝染液数滴，数秒钟后用水洗去，水干后置显微镜下观察，结果孢子为赤色，菌体为青色；
另一种方法是用孔雀绿芽孢染液进行染色，但无需加热，干后置油镜下观察子囊孢子。
来源：丁香实验
