免疫金试纸膜和试剂盒检测法

因为胶体金具有肉眼可观察的红色，所以为不需要任何仪器的试纸膜或试剂盒法的免疫检测提供了可能，利用免疫金试纸膜法检测的模式可以很灵活，根据具体情况可以采用不同的方式：既可以标记抗体，又可以标记抗原；既可以采用标记抗原与待测抗原的竞争方式进行检测，又可以利用标记抗体或标记二抗的夹心法方式进行检测。

美国PAN PROBE、INC、生物技术公司生产的产品名称为“快速一步法胶体金尿测试条”的胶体金试纸，有以下几种产品种类：(1)吗啡／海洛因／鸦片；(2)可卡因；(3)苯丙胺；(4)甲基苯丙胺；(5)大麻；(6)安定。这种检测试条的检测时间是5min，在室温下保存有效期两年．使用方法是将3滴尿液加入加样孔，双红线为阴性，单红线为阳性^[3] ．

本试验基于抗原／抗体结合反应的原理，并被用于对人类尿样中吗啡和鸦片制品的分析检测．分析过程中，在尿样中的药物及其代谢物与固着在渗透膜上的药物缀合物共同竞争在有色微小颗粒上的有限的抗体结合部位．试验尿样被滴入到渗透膜一端的样本液槽中．如果尿样含有所要检测的药物，那么药物及其代谢产物会竞争在微小颗粒上的有限的抗体结合部位、当药物很充足时，它们会全部占据抗体结合部位、这会阻止有色微小颗粒和膜上试验探极区相结合．这样阳性尿样在试验区就不会出现沉淀色带．试纸上另一条对照色带是另一处抗体反应区，它表明试验是可靠的．在作试验结果判断前，对照色带总是应该出现的．一般情况下，阴性结果是出现两条色带：一条为对照色带，在试验区还出现一条色带沉淀线，而阳性结果只出现一条色带。

市面上大量使用的早早孕HCG胶体金试纸，采用了双抗体夹心法的检测模式．阳性尿样是双红线，阴性尿样是单红线、人体绒毛膜促性腺激素(HCG)的含量是衡量怀孕与否的重要指标，怀孕妇女尿液中的HCG浓度比末怀孕妇女显著增高．HCG抗体1预先被固定在试纸膜的特定部位上(就是检测线出现的部位)，金标HCG抗体2被平铺在尿样展开时经过的区域、当阳性尿样被加入时，尿样中的HCG首先与膜上平铺的金标HCG抗体2结合，随着尿样的展开最终被固定在HCG抗体1的地方并显色。当阴性尿样被加入后，由于没有HCG与金标抗体2结合，最终金标抗体2不会在抗体1处被富集，所以检测线不出现红色^[6] ．

艾滋病I／II型定性试剂盒也采用了胶体金标记的方法，检测的是人体血清中的艾滋病病毒(human immunodeficiency virus，HIV)特异性抗体。

便隐血胶体金试纸可以检测粪便中微量人血红蛋白，为早期胃肠道肿瘤发现和诊断提供了依据。目前便隐血胶体金试纸已被一些医院临床采用，并在健康人群体检中运用．便隐血胶体金试纸检验法采用双抗体的三明治夹心免疫检验法，特异性抗体是针对粪便样品中的血红蛋白(Hb)．如果便样中含有Hb，它就会和试剂中的金标抗体组成抗原抗体复合物，再和反应区中的另一种Hb抗体形成紫红色的色带，如果便样中无Hb，反应区中就不会有色带出现．

梅毒胶体金法试剂盒采用免疫胶体金技术，通过硝酸纤维素膜上包被特异性梅毒基因重组抗原，检测标本中特异性的梅毒抗体，梅毒胶体金法具有较好的特异性和灵敏度，在用于供血者筛选时优于TRUST法，且操作简便，结果判断清晰快速，但其必须使用血清或血浆，不适合街头一次性流动采血^[7] 。

此外还有其他的一些胶体金试剂盒，象“滴金法快速检测幽门螺杆菌感染试剂盒”等，好多种用于细菌、病毒检验的胶体金试剂盒。

现有胶体金试剂盒很多，价格和质量各异，适用性不同，应遵循合理的原则加以选择，以期最小的花费达到最佳的效果。

胶体金技术因其独特的优越性，现在应用已越来越广，但世上无十全十美之物，胶体金也有其缺点。

（1）、配体固定于胶体金主要依赖物理吸附作用，而并非各种生物学活性分子都可被吸附。因此胶体金适用性虽广，但并非适用于各种物质的测定。

（2）、配体与胶体金结合的机理至今尚不甚明了，因此制备试剂的操作、产品质量等相当程度上有赖于经验。

（3）、胶体金在制备和使用时对水质及器具的清洁度要求甚高，各种污染可使试剂自凝或产生非特异的IGSS反应。

（4）、胶体金先包以牛血清白蛋白等惰性蛋白质，经活化后再与配体化学交联结合，从而可结合不能被吸附的配体，并使之保持良好的定向和稳定性，但操作麻烦，产品得率低。