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光密度optical density

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具有某波长的光强度为I0 ,通过溶液层后,强度变为 I时,则把 log10 I0 I)称为该波长的光密度(简与为 O D.)或称为吸收率( absorbance ab- sorbancy)。当兰伯特 -比尔( Lambert Beer)法则成立时,则有 log10 I0 I)=ε cd的关系。ε是克分子吸收系数, c是溶液的克分子浓度, d是溶液层的厚度。因而,若ε和 d已知,则通过测定光密度,就可决定浓度 c。但关于光密度以及吸收率等的定义是相当不明确的,也有将 log10 I0 I)称为吸收率,将吸收率用 d除所得商,就称为光密度。这时只要兰伯特 -比尔法则成立, O D.就与ε c相等,所以 O D.与溶液的浓度成正比。因而,若已知其标准状况的 O D.,则由测定该物质溶液的 O D.,就可求出浓度。蛋白质的情况,把 1%的溶液在 280毫微米的 O D.作为标准,如可表

可得其百分浓度。 O D.是和浓度成正比的量,而关于核酸或核蛋白质,则可用 O D.表示其绝对量。这种情况,将该物质溶于 1毫升溶液时,在 260毫微米的 O D.正好是 1的量,就把这个量称为 1O D.单位。例如,将 RNA噬菌体 1毫克溶于 1毫升的 O D.大约是 8,所以 1毫克相当于 8O D.单位,反之 RNA噬菌体 1O D.单位就是 1 8毫克。这时把吸收率定义为与 O D.相同, d=1厘米的情形,有时也表示为 A260 单位。 RNA噬菌体 1毫克就是 8A260 单位。

 

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