具有某波长的光强度为I
0 ,通过溶液层后,强度变为 I
时,则把 log
10 ( I
0 / I
)称为该波长的光密度(简与为 O
. D
.)或称为吸收率( absorbance
, ab- sorbancy
)。当兰伯特 -
比尔( Lambert
- Beer
)法则成立时,则有 log
10 ( I
0 / I
)=ε cd
的关系。ε是克分子吸收系数, c
是溶液的克分子浓度, d
是溶液层的厚度。因而,若ε和 d
已知,则通过测定光密度,就可决定浓度 c
。但关于光密度以及吸收率等的定义是相当不明确的,也有将 log
10 ( I
0 / I
)称为吸收率,将吸收率用 d
除所得商,就称为光密度。这时只要兰伯特 -
比尔法则成立, O
. D
.就与ε c
相等,所以 O
. D
.与溶液的浓度成正比。因而,若已知其标准状况的 O
. D
.,则由测定该物质溶液的 O
. D
.,就可求出浓度。蛋白质的情况,把 1
%的溶液在 280
毫微米的 O
. D
.作为标准,如可表
可得其百分浓度。 O. D.是和浓度成正比的量,而关于核酸或核蛋白质,则可用 O. D.表示其绝对量。这种情况,将该物质溶于 1毫升溶液时,在 260毫微米的 O. D.正好是 1的量,就把这个量称为 1O. D.单位。例如,将 RNA噬菌体 1毫克溶于 1毫升的 O. D.大约是 8,所以 1毫克相当于 8O. D.单位,反之 RNA噬菌体 1O. D.单位就是 1/ 8毫克。这时把吸收率定义为与 O. D.相同, d=1厘米的情形,有时也表示为 A260 单位。 RNA噬菌体 1毫克就是 8A260 单位。