丝状真菌观察法
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丝状真菌地鉴定主要根据形态特征。形态特征包括群体形态和个体形态。
1 群体形态 群体形态即菌落的形态。观察菌落形态时多采用固定的培养基,将固体培养基制成平板,以点植法接种,即用接种针尖沾取少量孢子点植在平板上适当的位置,例如中心,或三角形的三点。然后于25-28℃培养一定时间(如2、4、7、10天)进行观察,观察时可用肉眼或借助放大镜、低倍镜、解剖镜等。观察的要点一般包括下列几项:
(1) 大小:它反映生长或发育速度,通常测量菌落的直径。
(2) 颜色:包括菌落表面子实体、气生菌丝、菌核的颜色和基内的颜色,还应注意培养基颜色的变化。
(3) 菌落表面的纹饰:如皱纹、辐射沟纹、同心环、整个菌落致密或疏松等。
(4) 菌落的质地:即菌落外观呈毡状、绒毛状、棉絮状、粉粒状、革质状,有无成束状或绳状的气菌丝。
(5) 菌落的高度:菌落扁平或凸起,中心部分凸起或凹陷。气生菌丝的高度。
(6) 菌落的边缘:全缘、锯齿状、树枝状等。
(7) 渗出物:指菌落表面有无液滴、液滴的颜色和数量。
2 个体形态 个体形态指菌丝的特征,子实体的形态(如孢子囊。子囊壳、子囊、担子果等的形态),孢子的形态(如孢囊孢子、分生孢子、芽孢子、节孢子、厚垣孢子、卵孢子、接合孢子、担孢子等)。由于丝状真菌的个体大都较小,必须制成载片标本在显微镜下观察。丝状真菌的制片比较简单,通常将乳酸苯酚(Lactophenol)液一滴,滴于载片上,再用解剖针挑取欲观察的培养物置此液滴内,并且用针尖将其分散开勿使成团,盖好盖片即得载片标本。这种载片可保存数月,如盖片四周涂封漆则可保存数年。
乳酸苯酚液的组成:
乳酸(比重1.20) 20克
石炭酸(结晶) 20克
甘油(比重1.25) 40克
蒸馏水 20克
参考文献:中国科学院微生物研究所 菌种保藏手册 773~774