药理实验基础知识

药理实验基础知识

 

 

 

 

一、        目的

1.    掌握基本操作，锻炼动手、动脑能力；

2.    更好地掌握药理学基本理论知识；

3.    培养科学思维

二、        基本要求

1.    实验前：预习实验内容并复习相关理论知识；

2.    实验时

⑴ 实验器材要妥善保管；

⑵ 实验操作按步骤进行，仔细观察实验中出现的现象，实事求是地做好记录；

⑶ 注意节约实验药品；

⑷ 维持良好的课堂纪律。

3.    实验后

⑴ 各组同学将实验动物处死，实验台擦干净，将实验方盘送回准备室；

⑵ 值日生搞好实验室卫生，将死亡动物送至指定场所；

⑶ 书写实验报告。

三、        实验报告的书写

1.    题目

2.    目的

3.    原理

4.    材料：实验动物，器材，药品

5.    方法：用自己的语言简单扼要描述出来；

6.    结果：要求真实、清楚；

7.    讨论：将实验结果进行比较、分析；实验中有哪些不足之处；结果异常或失败的原因；

8.    结论：将实验结果进行归纳总结，应带有提示性质。

四、        实验设计基本原则

1.    随机原则

使每一实验对象都有同等的机会抽到实验组或对照组中，除处理因素外其他因素尽可能均衡一致，从而抵消非实验因素的影响。

2.    对照原则

⑴ 组间对照：阴性对照，阳性对照，同因素不同水平对照；

⑵ 自身前后对照

3.    重复原则

五、        实验动物

1.    动物的选择

  ⑴ 小白鼠：适用于需大量动物的实验，如某些药物的筛选，半数致死量的测定。也较适用于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。

 

 

  ⑵ 大白鼠：比较适用于抗炎药物实验，血压测定、利胆、利尿药实验，也可用于进行亚急性和慢性毒性实验。

 

 

  ⑶ 豚鼠：因其对组胺敏感，并易于致敏，故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。也常用于离体心脏、心房、肠管实验。又因它对结核敏感，常用于抗结核病药的实验。

 

 

⑷ 家兔：常用于观察研究脑电生理作用，药物对小肠的作用。由于家兔体温变化敏感，也常用于体温实验，用于热原检查。

 

 

⑸ 狗：狗是记录血压，呼吸最常用的大动物。还可利用狗做成胃瘘、肠瘘，以观察药物对胃肠蠕动和分泌的影响。在进行慢性毒性实验时，也常采用狗。

 

 

2. 实验动物的编号

 

 

狗、兔等较大的动物可用特制的铝质号码牌固定在颈部或耳上。大鼠、小鼠如为白色可用黄色苦味酸在不同的体表标志上标记。

 

 

3. 麻醉药的选择

 

 

⑴ 局部麻醉：常采用 2 ％普鲁卡因做皮下浸润注射，可用于局部手术。

 

 

⑵ 全身麻醉：

 

 

① 吸入麻醉：可将乙醚蘸在棉球上放入玻璃罩内，利用乙醚挥发的性质，经肺泡吸收，作用较快，适用于小鼠、大鼠短时间麻醉。

 

 

② 注射麻醉：常用戌巴比妥钠和乌拉坦。

 

 

4. 动物捉拿及固定方法

 

 

⑴ 小白鼠

 

 

右手抓住其尾部放在鼠笼盖铁纱网上，用左手拇指及食指沿其背部向前抓起颈背部皮肤，并以左手的小指、无名指固定其尾部，便可将小鼠固定在手上。

 

 

⑵ 大白鼠

 

 

用右手提起尾部，放在粗糙面上，左手的拇指和食指捉其头部，其余三指夹住背腹部即可固定。

 

 

⑶ 豚鼠

 

 

豚鼠性情温和不咬人，用手握住躯干即可。、

 

 

⑷ 家兔

 

 

可用一手抓住家兔颈背部皮肤，将兔提起，另一手托其臀部，使兔呈坐位姿势。在进行仰位手术操作时，可用绳带将其四肢仰位捆绑在兔手术台上。头部用兔头固定夹固定。

 

 

5. 动物的给药方法

 

 

    ⑴ 小白鼠

 

 

① 灌胃法 (i.g.) ：以左手固定小鼠后，使其腹部朝上，颈部伸直。右手持配有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，再从舌面沿上腭进入食道。小鼠灌胃容量一般为 0.1 ～ 0.3m1 ／ 10g 。

 

 

② 腹腔注射 (i.p.) ：以左手固定小鼠，方法同灌胃，右手持注射器，取 30 度角将针头从下腹部向头端刺入腹腔。进针部位不宜过高，刺入不宜太深，以免伤及内脏。小鼠腹腔注射量一般为 0.1 ～ 0.3ml ／ l0g 。

 

 

③ 皮下注射 (s.c.) ：用左手固定小鼠后，右手持注射器于拇指和食指捏起的皮肤处进针即可。

 

 

④ 静脉注射 (i.v.) ：将小鼠置于特制的固定筒内或倒置的大漏斗下，让其尾部露出。用酒精或二甲苯涂擦尾部，或将鼠尾在 50'C 热水中浸泡半分钟使血管扩张。左手拉尾端，右手持注射器将针头刺入尾静脉，推入药液。

 

 

⑵ 家兔

 

 

① 灌胃：需两人合作进行。一人取坐位用两腿夹持兔身，左手握家兔双耳，右手抓住两前肢。另一人将木制开口器横插家兔口内，压住舌头并固定之。取 8 号导尿管从开口器中部小孔插入食道。插管时如误入气管会出现动物的挣扎和呼吸困难。也可将导尿管的外端浸入水中，如有气泡吹出，表示插在气管内，此时应拔管重插。当判明导尿管在食道以内后，用注射器接通导尿管将药液推入。

 

 

② 皮下、腹腔注射：给药方法基本上同小鼠，唯针头可稍大，给药量可稍多。皮下与肌内为 0.5 ～ 1.0/mg ，腹腔为 1.0 ～ 5.0ml/mg 。

 

 

③ 静脉注射：将家兔置固定箱内，拨去耳壳外缘的毛，选择一条比较明显的耳缘静脉，用酒精棉球涂擦皮肤，使血管显露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖部，食指垫在兔耳注射处的下面，右手持注射器，将针头从近耳尖处刺入，当确认针头在血管中后，将药液推入。

 

 

1.      动物的处死：大、小鼠通常用颈椎脱臼法处死。