植物可溶性糖含量的测定
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一、试材及用具
1.试材 新鲜或冷冻的植物材料
2.仪器及试剂 高速组织捣碎机、电热恒温水浴锅、1000W调温电炉以及200mL、250mL容量瓶、250mL锥形瓶及50mL碱式滴定管等玻璃仪器;试剂主要包括费林试剂及亚甲基蓝溶液等。
二、原理
本实验的主要原理:在加热条件下,用还原糖溶液滴定一定量的费林试剂时,将费林试剂中的二价铜还原为一价铜,以亚甲基蓝为指示剂,稍过量的还原糖立即使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝。通过实验,学习并掌握用费林试剂滴定法测定可溶性糖的原理和方法。
三、方法步骤
(一)试剂配制
1.费林试剂甲:称取硫酸铜(CuSO4•5H2O,分析纯)34.6g溶于水中,稀释至500mL,过滤,贮于棕色瓶内。
2.费林试剂乙:称取氢氧化钠50g和酒石酸钾钠(KNaC4O6H4•4H2O,分析纯)138g溶于水中,稀释至500mL,用石棉垫漏斗抽滤。
3.转化糖标准溶液:称取9.5g蔗糖(分析纯)用水溶解后转入1000mL容量瓶中,加入6mol/L HCl(分析纯)10mL,加水至100mL。在20~25℃下放置三天或在25℃保温24h,然后用水定容(此为酸化的1%转化糖液,可保存3~4个月)。测定时,取1%转化糖液25.00mL放入250mL容量瓶中,加入甲基红指示剂一滴,用1mol/L NaOH溶液中和后用水定容,即为1mg/mL转化糖标准溶液。
4.亚甲基蓝溶液:称取0.5g亚甲基蓝(分析纯)溶于10mL水中。
5.乙酸锌溶液:称取21.9g乙酸锌