细胞计数
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实验目的
学习、掌握细胞培养 中最基本的细胞计数方法。
实验原理
应用显微镜的成像原理,并借助血细胞计数板,计算单位体积的细胞或微小生物的数量。
材料用品
~undefined*材料:鸡血红细胞悬液
~undefined*药品:0.17mol/L氯化钠溶液
~undefined*仪器(请参看仪器图库):吸管及胶头、细胞计数板及计数器、显微镜
常用细胞计数板细胞计数板之计数小格一次性细胞计数板细胞计数器
实验步骤
1.制备鸡血红细胞悬液(1份鸡血+10份0.17mol/L氯化钠溶液)
2.用乙醇清洁计数板及专用盖玻片,然后用绸布轻轻拭干。
3.用吸管轻吸细胞悬液,取少许细胞悬液,在计数板上盖玻片的一侧加微量细胞悬液。
4.用10×物镜观察计数板四角大方格中的细胞数。
5.细胞数/mL原液=(4大方格细胞数之和/4)×104×稀释倍数
用表格表示测定的细胞密度与数目。
实验结果
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注意事项
1、 务必使细胞分散成单个细胞,取样计数前,应充分混匀细胞悬液。
2、 充液后静止1-2分钟,待红细胞下沉后,方可进行计数。
3、 对于分布在刻线上的红细胞,依照“数上不数下,数左不数右“的原则进行计数。计数时,如发现各中方格的红细胞数目相差20个以上,表示血细胞分布不均匀,必须重新计数。