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核仁组织者区的AgNO3染色

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一、原理
1976年Goodpasture等应用银染色技术,使9种哺乳动物 的核仁组织者区(NORs)特异性的染为黑色,该技术被称为Ag-As的银染技术,银染色阳性的NORs被称为Ag-NORs,与Hsu等人用原位分子杂交得到的结果比较,表明Ag-NORs就是18S+28S核糖体基因(rDNA)的分布区,后证实染色的不是rDNA基因本身,而是与rDNA转录有关的一种酸性蛋白。因此,银染色的是有转录活性的NORs。

二、用品和试剂
染色体 制片,水浴锅。
试剂:50%硝酸银溶液:5g硝酸银(AR)溶解在10ml蒸馏水中,保存在铝箔包裹的玻璃容器内,可稳定保存1年。明胶显影液∶2g 明胶粉末溶解在99ml蒸馏水中,加1ml甲酸。

三、操作步骤
l.在一培养皿底部放一张蒸馏水润湿的滤纸,上放两根竹签,置水浴内保温60℃。
2.将玻片标本正面向上平放其上,将50%硝酸银溶液和明胶显影液以2∶1体积混匀,立即加至玻片上,覆以盖片,至玻片标本呈现褐色为止,一般3—4min。
3.自来水流洗去盖片和染料,空气中晾干。
4.镜检。

四、注意事项
如银染的染色体形态过浅,可用2% Giemsa复染1—3min.
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