人类巴氏小体的观察

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一、目的
1，掌握人类x小体（巴氏小体）玻片标本制作方法
2，观察识别巴氏小体形态特征及所在部位，
鉴定个体的性别。

二、原理
巴氏小体又称X小体：正常女性，位于间期细胞核 中，紧贴核膜内缘，大小约1～1.5 um，呈现三角或椭圆形小体，数量为x染色体数减一。巴氏小体是由于女性两个X染色体中的一个失活形成的。
Lyon的剂量补偿学说认为：女性有两个X染色体 ，但所表达的绝大部分遗传物质与只有1个X染色体的男性是一样多的。
这是因为女性的X染色体中只有1个保持活性，而另一个是晚复制的，没有活性。该失活的染色体在形态学上
呈异染色体，即DNA螺旋压的很紧，染色深而致密，称之为巴氏小体。

三、实验材料
口腔粘膜细胞，毛根鞘细胞显微镜，载玻片，盖玻片，牙签，吸管固定液（甲醇:冰醋酸＝3:1），生理盐水，
苯酚品红染液

四、实验步骤
1）取材
口腔粘膜细胞：受检者清水漱口数次，用洁净牙签从女性口腔两侧刮取粘膜，原位刮2～3次，第一次舍去，第2，3次分别涂于干净载玻片上。
发根细胞：拔取女性带有毛囊的头发（约2cm），置于载玻片上。
2）固定
将置于离心管中的材料（口腔粘膜细胞），首先2000rpm离心20min，弃上清，加入新配置的固定液（甲醇:冰醋酸＝3:1），37℃下静置30min，再1000rpm离心15min弃上清，加入1ml固定液（甲醇:冰醋酸＝3:1）制成细胞悬液。
置于载玻片上，待材料干后滴加固定液（95％乙醇:乙醚＝1:1）固定1h，空气干燥。
3）染色、制片
细胞悬液一滴于载玻片上，固定20min，蒸馏水洗2～3min，1N盐酸37℃水浴20min，晾干，滴加1～2滴染液染色20～30min（勿干），细水洗去染液，晾干。
直接涂片的：滴加染液，室温20～30min（勿干），加盖玻片，压片。
发Ḋ细胞：拔掉毛干，直接滴加5N盐酸于毛囊细胞处，处理5min，吸去盐酸，滴加染液，染色20min，加盖玻片，压片。

五、镜检
在高倍镜或油镜下观察（巴氏小体）