培养基母液的配置注意事项

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培养基 配制通常先根据各组分性质，配制成较浓的母液(母液浓度为培养基浓度的若干倍如50或100倍)，贮存在冰箱中备用，以后配制培养基时根据用量量取。由于培养基成分较多，如果每配制一次即进行多次称量(不少成分用量较微)，不仅会造成较大的误差，而且会增加工作量，因而配制母液可使培养基配制方便准确。配制大量成分母液通常为原培养基浓度的20、50或100倍，倍数不宜过高。MS培养基母液及培养基配方法参考表2。

大量成分母液经常将CaCl2·2H2O单独配制 保存，以免长期贮存发生沉淀。若将全部大量成分配在一起时，为防止在混合时发生沉淀，须在各药品充分溶解后，按表1.2中化合物出现顺序混合，氯化钙最后加入，以免与硫酸镁形成沉淀.大量成分称量溶解后，在1000 ml容量瓶中定 容，然后移入磨口瓶中，贴上标签，置于普通冰箱(4℃)贮存。

微量元素母液配制时，由于培养 基中微量元素用量甚微，浓度为0.l~0.0001mg/l，所以母液浓度宜为原培养基配方中用量的100倍。一般将微量元素分别称量溶解，定容在1000 ml容量瓶中后贮存在一个细口瓶中，但也有将KI分别配制，单独贮存在棕色瓶中。配好后，贴上标签，贮存于4℃冰箱。

培养基中的铁盐母液一般单独配制。目前常用的铁盐为硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二纳的螯合物。称取Na2-EDTA 3.73 g，FeSO4 ·2H2O 2.78 g，分别溶解(可加热)，然后混合定溶于1000 ml容量瓶中。转入细口瓶，贴上标签，4℃冰箱中保存。

氨基酸和维生素等有机成分母液可配制时，母液浓度通常为原培养基配方的50倍(或100)。常用氨基酸和维生素为水溶性物质，可用蒸馏水溶解，但叶酸要先用少量稀碱或稀氨水溶解，然后用重蒸馏水定容。配制好后，转入细口瓶，贴上标签，-20℃(或4℃)冰箱中保存。

植物生长调节物质如生长素类和细胞分裂素类可以根据需要，灵活设计其浓度，一般为 0.01、0.1、0.2、0.5或1 mg/l。如配0.5 mg/l NAA母液，称25 mg NAA溶于50 ml重蒸馏水，或50 mg的NAA定溶于100 ml重蒸馏水中。IAA要用棕色瓶暗中贮存，以免光照分解。常用植物生长调节物质和维生素特征见表3。生长素为醇溶性物质，配制时，应用少量95%酒精或稀碱溶解，然后用重蒸馏水溶解定容;细胞分裂素应先用少量1 N NaOH或HCl溶解，然后用重蒸馏水定容。配制好的母液放置在4℃普通冰箱中备用。这些母液保存时间不宜过长，当出现沉淀、浑浊及霉菌团时，应重新配制。

椰乳中因含有许多种细胞分裂素物质，如KT类似物(9-β-D-ribofuranosylzeatin)、玉米素及玉米素核糖甙等，有时可与细胞分裂素相互代替。采集到椰子时，应检查其汁液(保证没有变质)，煮沸，滤纸过滤掉蛋白，高温高压消毒，贮存在-20℃下备用。有时可直接加入培养基。酵母提取液也一般也现用现配，称量酵母粉后，加热至沸腾30分钟，过滤去渣。