293T细胞的培养与传代心得

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293细胞

293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时表达SV40大T抗原 ，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。

大家注意293T细胞的一个重要特性：室温下不贴壁，但37度时可以重新贴壁。

我的293T细胞时老板从美国千里迢迢带回来的，当时正是冬天，老板把瓶子放在大衣口袋里在飞机上折腾了两天，等拿到实验室已经看不到贴壁的细胞了。我以为在外面这么久细胞可能已经冻死了，肯定没救了。

但本着死马当活马医的想法在培养箱里放了一个星期，还是不见起色。正准备丢的时候，一次上网查293T细胞的特性时看到：“室温下不贴壁，但37度时可以重新贴壁”。

如获至宝，赶紧跑到实验室在显微镜下仔细寻找，竟然真的发现少量贴壁细胞，后来经过我们的细心呵护，这些细胞终于活了下来。通过这个也让我明白了一个道理，不到最后时刻不要轻言放弃。

言规正传，这个细胞我按照老板在美国的习惯处理：

用90%的DMEM +10%的胎牛血清培养37度培养箱。

这个细胞增殖很快，大概2-3天就要传代。需要提醒的是：细胞贴壁很疏松，换液时注意不要用力摇晃培养瓶，否则有可能会把细胞摇下来。

细胞 容易消化，我用0.02 g/L蛋白酶E消化半分钟就可以了。要注意的是：消化下来的细胞容易成团，要吹打很久才能把细胞打开。否则传代后细胞会成团生长，不均匀，影响试验结果。