HBSS的配制和使用攻略
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在众多实验缓冲液中,HBSS显得有点默默无名。HBSS主要用于培养液的配制或清洗细胞,不能单独使用。本文介绍HBSS的配制和使用方法。
HBSS,即汉克斯平衡盐。英文全名Hank's Balanced Salt Solution。D-Hank's与Hank's的一个主要区别在于前者不含有钙和镁离子,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。Hank平衡盐溶液( HBSS)的配方为:8 g/L NaCl, 0.4 g/L KCl, 1 g/L 葡萄糖, 60 mg/L KH2 PO4 , 47.5 mg/L Na2 HPO4 , 调pH至7.2.一般用于配制细胞培养 过程中的培养基或者清洗细胞。
Hank's配方:NaCl 8.01;KCl 0.4;CaCl2 0.14;NaHCO3 0.35;KH2 PO4 0.06;Glucose 0.34(g/l);
Hank平衡盐溶液( HBSS)的配方为:8 g/L NaCl, 0.4 g/L KCl, 1 g/L 葡萄糖, 60 mg/L KH2 PO4 , 47.5 mg/L Na2 HPO4 , 调pH至7.2.
HBSS一共分为四种,含钙镁,含酚红;含钙镁,不含酚红;不含钙镁,含酚红(D-Hanks );不含钙镁,不含酚红(D-Hanks)。此四种产品可根据客户需要自己选择。而如果客户无法判断应该选择哪一种,可以选不含钙镁,不含酚红(D-Hanks )。
Hanks’ 含钙镁 含酚红 |
Hanks’ 含钙镁, 不含酚红 |
D- Hanks’ 不含钙镁 含酚红 |
D- Hanks’ 不含钙镁 不含酚红 |
DPBS 不含钙镁 不含酚红 |
PBS 不含钙镁 不含酚红 |
1undefinedPBS 不含钙镁 不含酚红 |
|
g/L | g/L | g/L | g/L | g/L | g/L | g/L | |
NaCl | 8 | 8 | 8 | 8 | 8 | 8 | 80 |
Na2 HPO. 12H2 O | 0.126 | 0.126 | 0.126 | 0.126 | 2.9 | 2.9 | 29 |
NaH2 PO4 · 2H2 O | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
KCl | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.2 | 0.2 | 2 |
KH2 PO4 | 0.06 | 0.06 | 0.06 | 0.06 | 0.2 | 0.24 | 2.4 |
MgSO4 | 0.098 | 0.098 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
CaCl2 | 0.14 | 0.14 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
D-葡萄糖 | 1 | 1 | 1 | 1 | 0 | 0 | 0 |
酚红 | 0.01 | 0 | 0.01 | 0 | 0 | 0 | 0 |
添加NaHCO3 | 0.35 | 0.35 | 0.35 | 0.35 | 0 | 0 | 0 |
那么,HBSS能高压灭菌吗?
答案是否定的。因为HBSS溶液里面含有1g/L的葡萄糖和碳酸氢根,高压会发生反应引起变性。通常大家都是过滤灭菌的。如果用量小,可以直接订购现成的。如果用量大,自己弄一套过滤的设备过滤也简单。不过无菌的瓶子稍微贵了些,呵呵。