原理
水解乳蛋白系乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解的产物,是常用的天然培养基。含有丰富的氨基酸;开始是为猴肾细胞培养设计的,但以后也用于培养基它很多细胞系,包括初代培养细胞等,效果很好。近年由于广泛使用合成培养基,已代替了乳白蛋白。但其成分简单,在培养基不足等特殊情况下尚有其应用价值。
材料与仪器
水解乳蛋白
Hanks
烧杯 滤纸 玻璃棒
Hanks
烧杯 滤纸 玻璃棒
步骤
1. 称量:称0.5 g 水解乳蛋白粉入烧杯中,加少许灭菌Hanks 液调成糊状;
2. 溶解:补加Hanks 液至100 ml,不断搅拌,令充分溶解,置室温1—2 小时,并不时搅拌;
3. 过滤:滤纸滤过,分装入瓶中;
4. 灭菌:10 磅10 分钟高压蒸汽灭菌后,4 ℃冰箱保存。
2. 溶解:补加Hanks 液至100 ml,不断搅拌,令充分溶解,置室温1—2 小时,并不时搅拌;
3. 过滤:滤纸滤过,分装入瓶中;
4. 灭菌:10 磅10 分钟高压蒸汽灭菌后,4 ℃冰箱保存。
注意事项
1. 水解乳白蛋白为蛋黄色粉末,易潮解结块,但不影响使用。其溶液呈微酸性。
2. 不同商品间,在色泽、氨基酸含量和营养价值上可能有一定差异,甚至影响细胞的生长,在更换品种时应进行预试验,以检测质量。
2. 不同商品间,在色泽、氨基酸含量和营养价值上可能有一定差异,甚至影响细胞的生长,在更换品种时应进行预试验,以检测质量。
来源:丁香实验