常用于淋巴细胞杂交瘤技术的实验动物

 

二、常用于淋巴细胞杂交瘤技术的实验动物

（一）小鼠BALB/C系

它是此技术中最常用的动物。目前用于细胞融合的小鼠骨髓瘤细胞几乎都来源于BALB/C系小鼠。其杂交瘤可接种于BALB/C或它的杂交第1代小鼠，从带瘤动物取血清或腹水制备单克隆抗体。

BALB/C系小鼠起源于Bagg从1913年开始维持的白化株（Albine stock）小鼠，Dowell从1923年开始作近交系培育，至1932年达26代，之后Snell将BALB加C即BALB/C，以前的近交历史不清，继之以Andervont为主，使BALB/C广泛传播和应用。1973年美国NIH增培育到近交157代。毛色基因为AA、bb、cc(白色)。H-2为d型。亚系有：BALB/cCd,BALB/cJ,BALB/cAnN等。该品系小鼠的主要特性：

1．免疫学特性：易患慢性肺炎。多数个体于6月龄以后出现免疫球蛋白过多症。主要是IgG1和IgA量的增加。免疫球蛋白的绝对量依饲养条件而异。腹腔注射矿物油后可引起浆细胞瘤。发生率0-60%，依亚系及饲养条件而异。较难诱发免疫耐受性。

2．生理学特性：血压较高。网状内皮系统器官与体重之比较大。大部分雄鼠在20日龄出现脾脏淀粉样性变。对放射线极度敏感。

　　3．癌发生率： 乳腺癌 发生率低（3%），但对致癌因子敏感。肾上腺和肺常发生，雌鼠的肺癌发生率为21%，网状细胞瘤为8%，血管瘤为6%，淋巴肉瘤为4.5%。

4．老化及寿命：老龄鼠出现心脏病和多发性动脉硬化症。平均寿命雄鼠为569～648天，雌鼠561～816天。252日龄平均体重为雄鼠30克雌鼠28克。

5．对细菌及病毒反应：该品系小鼠对鼠伤寒沙门氏菌C′5敏感，对麻疹病毒中度敏感。

6．饲养注意点：生育年龄长（至12月龄），容易饲养繁殖，最适稍高温度。为26-27℃因为体型较细，除了日常饲料外，每日早晚每只各喂1克白面包，每星期喂二次木鱼（日本传统加工食品），稍肥后较易繁殖，根据我们的饲养经验每周加三次煮熟的鸡蛋，效果很为满意。该品系小鼠易患肺炎，最好不要和其它近交系小鼠同室饲养，不使其它近交系小鼠发病的环境病原菌易使BALB/C鼠患鼠。

（二）大鼠LOU（又称LOU/Wsl）系

该品系可能来自Wistar大鼠，是1956年开始近亲交配而形成的品系。约在一岁龄时，大鼠回盲部淋巴结产生一种自发性肿瘤，发展迅速，当触及肿瘤后的一个月内死亡。此种肿瘤的发生率超过10%，形态为极低分化为淋巴细胞，称之为大鼠回盲部免疫细胞瘤（Rat Ileocecal Immunoocytoma），此种肿瘤移植于同系大鼠或其杂交第1代均易发生。

此种肿瘤约有60%病例合成单克隆性IgG或IgA，或K型Bence-Jones蛋白。未发现产生IgM。大鼠Y3-Ag1.2.3骨髓瘤细胞系是LOU系大鼠骨髓瘤体外培养所慕名而获，故LOU系大鼠也适用于B细胞杂交瘤技术。

LOU/C大鼠8月龄以上的雄鼠自发性浆细胞瘤发生率为30%，而雌鼠为16%，常发生在回肠淋巴结，其中60%的这种浆细胞瘤合成单克隆免疫球蛋白IgG1(35%)、IgE(36%)或IgA。LOU/C与LOU/M的组织相溶性相同，可以互相接种进行皮肤移植。

双特异性单克隆抗体（BSMCA）的研究，是项国剑桥大学分子生物学实验室Milstein博士（单克隆抗体技术创始人之一）正在进行的研究，国际上刚开始，制备双特异性单克隆抗体就必须要使用LOU大鼠。同时，用LOU大鼠制备单克隆抗体其腹水产量比用BALB/C小鼠大几十倍，能较好地解决单克隆抗体的大量制备。双特异性单克隆抗体技术和杂交～杂瘤技术是单克隆抗体技术的新进展，BSMCA可代替交联剂，代替酶标技术，在免疫组化和免疫测定技术有广泛的应用价值，在癌症的导向治疗和体外免疫扫描诊断上有广阔的应用前景。