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淋巴细胞杂交瘤技术的常用实验动物

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 (一)小鼠BALB/C系
  它是此技术中最常用的动物。目前用于细胞融合的小鼠骨髓瘤细胞几乎都来源于BALB/C系小鼠。其杂交瘤可接种于BALB/C或它的杂交第1代小鼠,从带瘤动物取血清或腹水制备单克隆抗体。
  BALB/C系小鼠起源于Bagg从1913年开始维持的白化株(Albine stock)小鼠,Dowell从1923年开始作近交系培育,至1932年达26代,之后Snell将BALB加C即BALB/C,以前的近交历史不清,继之以Andervont为主,使BALB/C广泛传播和应用。1973年美国NIH增培育到近交157代。毛色基因为AA、bb、cc(白色)。H-2为d型。亚系有:BALB/cCd,BALB/cJ,BALB/cAnN等。该品系小鼠的主要特性:
  1.免疫学特性:易患慢性肺炎。多数个体于6月龄以后出现免疫球蛋白过多症。主要是IgG1和IgA量的增加。免疫球蛋白的绝对量依饲养条件而异。腹腔注射矿物油后可引起浆细胞瘤。发生率0-60%,依亚系及饲养条件而异。较难诱发免疫耐受性。
  2.生理学特性:血压较高。网状内皮系统器官与体重之比较大。大部分雄鼠在20日龄出现脾脏淀粉样性变。对放射线极度敏感。
  3.癌发生率:乳腺癌发生率低(3%),但对致癌因子敏感。肾上腺和肺常发生,雌鼠的肺癌发生率为21%,网状细胞瘤为8%,血管瘤为6%,淋巴肉瘤为4.5%。
  4.老化及寿命:老龄鼠出现心脏病和多发性动脉硬化症。平均寿命雄鼠为569~648天,雌鼠561~816天。252日龄平均体重为雄鼠30克雌鼠28克。
  5.对细菌及病毒反应:该品系小鼠对鼠伤寒沙门氏菌C′5敏感,对麻疹病毒中度敏感。
  6.饲养注意点:生育年龄长(至12月龄),容易饲养繁殖,最适稍高温度。为26-27℃因为体型较细,除了日常饲料外,每日早晚每只各喂1克白面包,每星期喂二次木鱼(日本传统加工食品),稍肥后较易繁殖,根据我们的饲养经验每周加三次煮熟的鸡蛋,效果很为满意。该品系小鼠易患肺炎,最好不要和其它近交系小鼠同室饲养,不使其它近交系小鼠发病的环境病原菌易使BALB/C鼠患鼠。
  (二)大鼠LOU(又称LOU/Wsl)系
  该品系可能来自Wistar大鼠,是1956年开始近亲交配而形成的品系。约在一岁龄时,大鼠回盲部淋巴结产生一种自发性肿瘤,发展迅速,当触及肿瘤后的一个月内死亡。此种肿瘤的发生率超过10%,形态为极低分化为淋巴细胞,称之为大鼠回盲部免疫细胞瘤(Rat Ileocecal Immunoocytoma),此种肿瘤移植于同系大鼠或其杂交第1代均易发生。
  此种肿瘤约有60%病例合成单克隆性IgG或IgA,或K型Bence-Jones蛋白。未发现产生IgM。大鼠Y3-Ag1.2.3骨髓瘤细胞系是LOU系大鼠骨髓瘤体外培养所慕名而获,故LOU系大鼠也适用于B细胞杂交瘤技术。
  LOU/C大鼠8月龄以上的雄鼠自发性浆细胞瘤发生率为30%,而雌鼠为16%,常发生在回肠淋巴结,其中60%的这种浆细胞瘤合成单克隆免疫球蛋白IgG1(35%)、IgE(36%)或IgA。LOU/C与LOU/M的组织相溶性相同,可以互相接种进行皮肤移植。
  双特异性单克隆抗体(BSMCA)的研究,是项国剑桥大学分子 生物 学实验室Milstein博士(单克隆 抗体 技术创始人之一)正在进行的研究,国际上刚开始,制备双特异性单克隆 抗体 就必须要使用LOU大鼠。同时,用LOU大鼠制备单克隆抗体其腹水产量比用BALB/C小鼠大几十倍,能较好地解决单克隆抗体的大量制备。双特异性单克隆抗体技术和杂交~杂瘤技术是单克隆抗体技术的新进展,BSMCA可代替交联剂,代替酶标技术,在免疫组化和免疫测定技术有广泛的应用价值,在癌症的导向治疗和体外免疫扫描诊断上有广阔的应用前景。
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