细胞爬片的方法与心得

<font><font>细胞爬片是细胞培养中比较经常会用到的，现将自己操作的一些方法与技巧拿与大家分享，如有不当的地方还望大家给与指正：<br /> 【爬片的准备】<br /> 1、爬片可用一般的盖玻片，也可用专用爬片；<br /> 2、应用盖玻片，可根据自己的需要剪裁成合适的大小，以备置于6孔板、12孔板或24孔板；<br /> 3、将剪裁好的爬片，置于浓硫酸中浸泡并过夜，第二天先用自来水冲洗20遍，再用三蒸水冲洗3遍（个人认为主要目的是冲洗干净就可以了），放在饭盒或者培养皿（一定是玻璃的哦，要不然就……）中烘干后进行高压消毒。<br /> 【培养板的准备】<br /> 1、 泡酸过夜<br /> 2、 冲洗，烘干（1、2步骤与前大致相同）<br /> 3、 放入超净工作台用紫外线照1～2小时就可以用了（在照之前可以将爬片一并放入，若细胞贴壁能力不强，可经多聚赖氨酸浸片后放入。贴壁能力强的话，就可以省略了，进行紫外线消毒）<br /> 注： 此步自己的经验是爬片可以先浸入消毒后的PBS内，紧接着放入培养板内。目的：浸过PBS的爬片依靠表面的液体，可以用培养板孔底贴和紧密，以利于细胞长到爬片上。（自己刚开始做的时候，经常就是细胞全都长在了爬片与培养板之间，爬片上细胞罕见。）<br /> 【细胞爬片】<br /> 1、 胰酶消化细胞后计数<br /> 2、 根据自己的需要选择合适的细胞密度种入培养板内即可<br /> 3、 第二天即可进行干预措施<br /> </font><br /> </font>