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MTT 与 CCK-8 测定细胞毒性和增值的优劣比较

丁香实验

2551

Cell Counting Kit-8

简称 CCK-8 试剂盒,是一种基于 WST-8 的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

WST-8

是一种类似于 MTT 的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的 formazan。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。


WST-8 & MTT

WST-8 是 MTT 的一种升级替代产品,和 MTT 或其它 MTT 类似产品如 XTT、MTS 等相比有明显的优点。首先,MTT 被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的 formazan 不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而 WST-8 和 XTT、MTS 产生的 formazan 都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤。

其次,WST-8 产生的 formazan 比 XTT 和 MTS 产生的 formazan 更易溶解。

再次,WST-8 比 XTT 和 MTS 更稳定, 使实验结果更加稳定。另外,WST-8 和 MTT、XTT 等相比,线性范围更宽,灵敏度更高。

该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。

总之,CCK-8 的原理跟 MTT 其实是相同的,不同之处在于 CCK-8 法生成的 formazan 是水溶性的,不需要再吸出培养液加入有机溶剂溶解这个步骤,因此可以减少一定的误差。其他优点就是重复性优于 MTT;对细胞毒性小;为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。
但是 CCK-8比MTT 的价格要贵不少,所以一般来说,还是 MTT 法用的多。

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