吗啡的镇痛作用

吗啡的镇痛作用

 

一、            目的：

 

 

1、 学习镇痛药的筛选方法

 

 

2、 观察吗啡的镇痛作用

 

 

二、            原理：

 

 

疼痛概念：由于伤害性刺激所引起的情绪反应、行为反应以及生理功能障碍。

 

 

疼痛是许多疾病的症状，是机体受到不良刺激或损害的一种信号和反应。根据疼痛所表现出的行为反应，目前应用的疼痛模型有：

 

 

1、 热刺激法

 

 

1)        辐射热刺激法

 

 

　用一定强度的温度来刺激动物躯体的某一部分使其产生疼痛反应。大白鼠以甩尾反应时间为痛反应指标。实验时，用秒表计时，从照射开始到甩尾的时间作为痛阈。

 

 

2)        热板法

 

 

　实验时，把小白鼠放在预先加热到 5 5℃金属板上，以舔后足为常用痛反应指标。给药后痛反应时间延长一倍以上者作为有效镇痛药物。

 

 

注意事项：

 

 

1)      反复连续测定应注意防止局部烫伤而影响结果。

 

 

2)      注意正常鼠体温应与室温相近，室温应在20℃左右。

 

 

3)      给药前测试痛阈时，注意反应时间少于2s（10s,热板法）或大于10s（30s，热板法）表示该动物反应过敏或迟钝，则剔除不用。

 

 

4)      热板法要求必须用雌性动物。

 

 

评价：

 

 

1)        仪器装置简单，反应灵敏，指标明确。

 

 

2)        对组织损伤小，可反复利用动物。

 

 

3)        痛反应潜伏期长，利于比较药物镇痛作用的强弱、快慢、持续时间。

 

 

4)        可用于筛选麻醉性和非麻醉性镇痛药

 

 

5)        但由于辐射热刺激法甩尾反应纯粹是一种脊髓反射，因此骨骼肌松弛药也会出现阳性结果，应加以注意。

 

 

2、 机械刺激法

 

 

1)        大白鼠尾尖压痛法　用钝刀口用力压大白鼠尾，以产生嘶叫作为痛阈值。此法与大白鼠的年龄关系很大，以 100-150g 体重为宜。压痛部位以大白鼠尾尖 1/3 处敏感性较高。

 

 

3、 电刺激法

 

 

1)        齿髓刺激法　目前公认牙髓神经是对痛颇敏感的刺激部位，其痛反应近似临床病理性疼痛。因此齿髓刺激法是评价镇痛药的标准而可靠的方法。此法适用于狗、猫、家兔、大白鼠等，其中以家兔应用最多。动物在麻醉下用电钻在牙齿上钻孔后，将电极插入齿髓作慢性埋藏电极。电刺激时，动物因疼痛会出现咀嚼运动与摆头等反应，这些反应可视为痛阈的指标。

 

 

方法评价：反应灵敏、稳定，电刺激引起的舔舌 / 咀嚼反应比较一致。

 

 

2)        鼠尾刺激法　以串脉冲方波刺激大白鼠尾尖 1/3 处，以引起甩尾和嘶叫反应的电流强度作为痛反应指标。

 

 

4、 化学刺激法　许多化学物质如强酸、强碱、钾离子、缓激肽等，接触到完整的皮肤和粘膜时，即引起疼痛反应。因此，将某些化学物质给入动物体内可产生疼痛，造成疼痛模型，作为研究疼痛生理及筛选镇痛药物的方法。小白鼠扭体法是筛选镇痛药的常用方法之一，采用一些化学刺激物注入小鼠腹腔内，引起深部的、大面积而较持久的疼痛刺激，致使小白鼠产生“扭体”反应（腹部内凹、躯干与后腿伸张、臀部高起）。观察给予化学刺激药物 15 分钟内发生“扭体”反应的小白鼠或各小白鼠发生的“扭体”次数。如：酒石酸蒂钾、醋酸等。化学刺激法是筛选非麻醉性镇痛药的常用方法。

 

 

三、            材料：

 

 

1、 动物：小鼠　雌性（雄性动物受热阴囊下垂，由于阴囊皮肤对热敏感，小鼠易跳跃，观察不到舔后足的现象。）

 

 

2、 器材：恒温水浴、热板、天平、鼠笼、注射器

 

 

3、 药品： 0.1% 盐酸吗啡、生理盐水

 

 

四、            方法：

 

 

1、 调节仪器： 5 5± 0. 5℃ 　　

 

 

注意：水量应以刚能浸入热板底为宜，不宜过多，致使热板漂浮。应保证热板底的温度是 5 5± 0. 5℃，

 

 

2、 预选：10只选6只合格鼠。

 

 

原则：

 

 

1)        痛阈值为从小鼠放入热板到出现舔后足现象的时间，用秒表计时。

 

 

2)        放入热板后，若小鼠跳跃者剔除。

 

 

3)        痛阈时间应在 10-30S 之间，否则剔除。

 

 

4)        应测两次痛阈时间，取均值，但需注意两次测定的时间间隔应超过 5 分钟。

 

 

3、 称重、标记、分组（按痛反应时间分组）。

 

 

4、 给药：

 

 

对照组： i.p. 　生理盐水　 0.15ml/10g

 

 

给药组： i.p. 　吗啡　 0.15ml/10g

 

 

测定给药后 15’ 、 30’ 、 45’ 、 60’ 的痛阈值。

 

 

注意：

 

 

1)        每隔 2’ 给药 1 只小鼠

 

 

2)        每只小鼠在一个时间点上测 1 次。

 

 

3)        每个热板只能放 1 只小鼠。

 

 

4)        小鼠 60S 还没有出现舔后足现象，应立即取出，防止小鼠脚掌烫伤。痛阈值按 60S 计。

 

 

5)        热板内不许有水、鼠粪等异物。

 

 

五、            结果处理：

 

 

a)        计算不同时间痛阈提高百分率：

 

 

痛阈提高百分率＝

 

 

 

　统计每四组同学的数据，求出均值，标准误，进行下一步计算。

 

 

b)        作图：以时间为横坐标，以痛阈提高百分率均值为纵坐标作图，以标准误描述误差线，各时间点以折线连接。

 

 

c)        T 检验：

 

 

同抗炎实验。