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新技术在研究细胞分裂中的蛋白分离中的应用

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染色体分离是细胞分裂过程中的关键步骤,近期一个由奥地利、德国等组成的国际科研小组运用RNAi技术、蛋白定位等技术对近百种之前未被全面认识的人类蛋白复合物进行了全面的分析,相关研究成果发表在science 杂志上。

近年来,利用酵母等真核模式生物 突变体,研究人员克隆了一些调控细胞分裂早期姊妹染色体黏着和后期黏着素酶解的关键基因,初步阐明了染色体分离的分子调控机理.由多亚基蛋白组成的黏着素是保证染色体正确黏着和分离的关键分子。在细胞分裂中后期过渡时,经过一系列的分子识别和互作导致黏着素蛋白选择性地降解,使染色体分离。

染色体 分离与细胞分裂是关系生命体生存的关键生命活动过程,在这2个过程中有大量的蛋白复合物参与调控。

近期,多国研究人员组成的联合研究小组应用RNAi技术对大量参与其中的蛋白质复合物进行扫描分析,整个过程鉴定了许多与染色体 分离、细胞分裂相关的蛋白复合物,但是,关于这些蛋白复合物的功能研究却十分罕见。

为了探明这些蛋白复合物,科学家们应用基因标签技术,蛋白定位技术、MitoCheck等技术分析100种人类蛋白复合物,这100种蛋白复合物大部分的还没有被全面的了解。这项新的研究工作将在前人的基础上,对这100个蛋白复合物进行全面的分析。

这种高通量的分析有助人们了解蛋白复合物的亚基、复合体等多个结构的生理功能。

这项研究大大加深了人们对于细胞分裂过程中染色体和蛋白分离的认识,对于进一步了解相关蛋白复合物的功能提供了重要参考,也侧面说明了RNAi技术在科研工作中的广阔应用前景。

原文摘要:

Systematic Analysis of Human Protein Complexes Identifies Chromosome Segregation Proteins

Chromosome segregation and cell division are essential, highly ordered processes that depend on numerous protein complexes. Results from recent RNA interference (RNAi) screens indicate that the identity and composition of these protein complexes is incompletely understood. Using gene tagging on bacterial artificial chromosomes, protein localization and tandem affinity purification-mass spectrometry, the MitoCheck consortium has analyzed about 100 human protein complexes, many of which had not or only incompletely been characterized. This work has led to the discovery of previously unknown, evolutionarily conserved subunits of the anaphase-promoting complex (APC/C) and the -tubulin ring complex (-TuRC), large complexes which are essential for spindle assembly and chromosome segregation. The approaches we describe here are generally applicable to high throughput follow-up analyses of phenotypic screens in mammalian cells.

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