MEM培养液出现沉淀问题解析
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配的MEM培养液,4度搅拌过夜后冻存,(GIBICO,含非必需氨基酸),冻融后有好多沉淀,结晶状。碳酸氢钠加的量稍微少了一点,会是它的问题吗?补充:培养液没有污染,不知道这些结晶对细胞生长会不会有影响?
问题分析:
1.配MEM不需要4度搅拌过夜吧,更不需要冻存。Gibco的粉剂溶于超纯水并充分搅拌,再加其他该加的东西,过滤后就行了,通常避光保存在4度就没问题了,不知道你的沉淀是否是因为动融产生的;
2.可能是是污染了!配MEM没有搅拌过夜的,一般搅拌四个小时就足够了!而且,配好的培养基不需要冻存。如果培养基中已加抗生素,可以把培养基作培养检验时,最好培养36小时以上,这样没有污染才真是没有污染。
3.配好的培养液在-20度冻存在水浴溶解后,由于里面加的碳酸氢钠可能会沉淀析出,呈絮状结晶,看起来好像是杂质(实际不是),把它用力摇一下,在37度水浴中加热10分钟左右,再加入15ml血清后,用吸管吹打混匀后,这样大多数情况下絮状物可消失,如果还剩少许仍然存在,只要确定没有污染,不必过滤,就可直接使用。