利用BLOCK

相关专题

 

 

 

 

选择BLOCK-iT™ Dicer RNAi试剂盒，利用RNA干扰技术（RNA interference，RNAi）进行简单、快速的基因阻断，您不必再花费时间设计siRNA oligo序列及检测它们的效率，就可直接获得RANi结果。

功能基因阻断研究的简单、快速的方法
RNA干扰（RNAi）正在成为一种最受欢迎的技术之一，用于在功能分析试验中有效地阻断特异基因的表达。通过这种方法，利用长度为21-23个核苷酸的小干扰RNA(siRNA )可以很容易地、特异地降解互补靶mRNA。
当前常用的用来在哺乳动物细胞中启动RNAi反应的方法包括以下几种：转染 合成的siRNA寡核苷酸（siRNA oligonucleocides），体外转录后通过Dicer酶将长的双链RNA（dsRNA）切割成Diced siRNA (d-siRNA)，或者导入能够表达siRNA的载体。在这些方法中，只有体外转录和切割（Dicing）能够形成d-siRNA 双链体的复杂池，继而经过转染进入细胞。这一过程可以很快产生结果，而无需再花费时间设计和检测多个序列，并确定哪一个将会导致显著的基因表达阻断。现在您可以通过BLOCK-iT™ Dicer RNAi 转染和BLOCK-iT™ Dicer RNAi TOPO®转录试剂盒简便、快速的获得所需要的RNAi的原始数据，方便地研究和选择模式系统中的目的基因。

BLOCK-iT™ Dicer试剂盒作用原理
BLOCK-iT™ Dicer反应的第一步是构建dsRNA模板。您可以通过BLOCK-iT™ Dicer RNAi TOPO®转录试剂盒（包括在BLOCK-iT™ complete Dicer RNAi试剂盒中）很容易地得到转录本，而且转录本产量大，纯度高，能够直接用来作为BLOCK-iT™ Dicer反应的底物，用高活性的Dicer酶消化后，使用试剂盒中提供的柱子快速纯化最终的d-siRNA，就可获得高纯度的d-siRNA库，并可以使用有口皆碑的Lipofectamine™ 2000转染 试剂将它导入细胞。