引领PCR仪创新革命的ABI Veriti

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ABI作为PCR仪 中最值得信赖的品牌，引领了PCR仪一系列创新性设计革命。Veriti系出名门，秉承了一贯的可靠性，并是真正意义上的梯度多重控温(六合一)梯度PCR仪。

温度梯度PCR仪 进展

温度梯度PCR仪最先由eppendorf 公司在1998年研发成功推向市场(Mastercycler Gradient)，此后Biometra、MJR、Bio-rad、Thermo等公司相继推出各种型号的温度梯度PCR仪，所采用的技术相差无几。那究竟什么是温度梯度PCR仪呢?可以把一次PCR扩增实验设置成一系列不同的退火温度条件(温度梯度)的实验，这样的仪器就叫梯度PCR仪。设置梯度的主要原因是因为被扩增的不同DNA片段，其最适退火温度不同，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，从而一次性PCR反应就可以筛选出表达量最高的最适退火温度，优化实验，进行有效的扩增。梯度PCR仪主要用于研究未知DNA退火温度的扩增，在节约成本的同时也节约了时间。梯度PCR仪在不设置梯度的情况下也可以做普通PCR扩增，可以说是一台多功能的PCR仪。

常规梯度PCR仪 原理

通常梯度PCR仪的热反应模块由分别控温的2组或3组Peltier元件组成，研究者可以设置跨样品基座的退火温度 范围，在2组或3组Peltier元件上设置不同的温度，通过热传导在样品基座上形成温度梯度。如图1图2分别为两种不同的在用梯度PCR仪的加热模块。

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图1 模块：2块 图2 模块：6块3组

由于PCR仪是精确控制温度的仪器，PCR反应要求样品基座有最好的温度均一性，样品基座的温度均一性与持续时间高度相关，时间越长，温度均一性越好，温度梯度越难以形成。因此，温度均一性要求与温度梯度形成互相矛盾。对于普通温度梯度PCR仪来说，样品基座上由于热传导的速率和边缘效应，本身会形成孔间温度差异。例如，两组Peltier设定温度分别为55℃和56℃，孔间温度差异为±0.5℃，这样，在同一组Peltier上两孔之间的最大温差为1℃，如图3所示。由于样品基座温度均一性为±0.5℃，所以设置温度梯度间隔在1℃以内意义不大，超过2.5℃则温度跨度太大，最好在1.5~2.5℃范围。并且，普通温度梯度PCR仪是通过热扩散(被动)形成温度梯度，不能准确设置和测定样品基座每一列的温度，退火温度时间设置长短对梯度温度的影响很大。因此，受技术限制，每次温度梯度实验也只有几个孔的数据有意义。

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图3 普通梯度PCR仪控温模拟示意图

创新的Veriti多重控温模块

只有具有准确控制样品基座不同区域温度(主动)形成温度梯度的技术才是功能完善的温度梯度PCR仪，才能真正起到优化PCR反应条件的作用，才能将优化PCR反应条件普遍应用，我们ABI Veriti温度梯度PCR仪就完美的做到了这一点。它采用VeriFlex™反应模块，使用6块独立的半导体加热模块，超越温度梯度功能，真正可以优化PCR，控制每个模块设置的温度， VeriFlex™反应模块的6块独立半导体又可以看作是6个可同时独立设置温度的小模块，相邻两个模块的最大设置温差5℃，整个模块的温度跨度为25℃，使得在一次PCR中能够使用6个不同引物(分别在6个Blocks上)。

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A B

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C

图4 Veriti温度梯度PCR仪示意图。A：Veriti外观;B：加热模块及实验成果;C：VeriFlex加热模块温度梯度与常规PCR仪温度梯度对比示意图

Veriti温度梯度PCR仪在使用中获得线性梯度，而不是非线性的“S”型曲线，可以达到温度控制的精确性，可实现PCR优化过程中精确的温度控制。Veriti温度梯度PCR仪采用6.5英寸VGA触摸式显示屏进行控制，简化繁琐的编程步骤，使PCR实验变得不再是漫长的等待，更有效的节省了实验时间，同时得到更优异的实验结果，是真正意义上的温度梯度PCR仪。