地高辛（DIG）产品选择指南——选择合适的标记

标记DNA探针

 

如果您有足够量的高纯度模板，建议您采用随机引物标记方法的DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I 和II。这两个试剂盒包含了标记、封闭、杂交和检测所需要的所有试剂，是真正意义上的一站式服务的试剂盒。二者之间的差别在于检测方法的不同：Starter Kit I采用了显色法，使用显色底物 NBT/BCIP；而Starter Kit II选用化学发光法底物CSPD。

 

如果您用来合成探针的DNA模板的量比较少或是质量不够高的时候，建议您使用PCR DIG Probe Synthesis Kit。该试剂盒专用于制备高灵敏度的杂交探针，例如单拷贝的基因。其另一个特点就是实验中无需定量斑点检测过程，通过定量凝胶电泳就可以快速确定PCR标记探针的效率。

 

用缺口平移法标记的DNA探针，可以控制探针长度，一般多用于原位杂交。

 

标记RNA探针

 

在Northern blot中即可以使用DNA探针，也可以使用RNA探针。通常，RNA探针的特异性和灵敏度都会更高一些；当然如果对灵敏度和特异性没有特别严格的要求的话，DNA探针会更方便操作。

 

 

如果您需要制备RNA探针的话，推荐您使用Northern Starter Kit。该试剂盒以线性的DNA为模板，通过SP6, T7或是T3 RNA聚合酶的作用将DIG-11-UTP掺入到转录的RNA中，借助化学发光底物CDP-Star检测。另一个产品DIG RNA Labeling Kit也可用于RNA探针的标记。

 

末端标记寡核苷酸Oligonucleotide

如果您的探针模板非常短，量也比较少，您可以选择末端标记法标记寡核苷酸探针。

 

 

(责任编辑：大汉昆仑王)