细菌计数方法

标准的做法是将定量菌悬液（1ml、0.5或0.1ml）加到冷却至50-55度融化的琼脂培养基中（一般做细菌菌落计数用营养琼脂平板，而做真菌菌落计数用沙氏平板）中混合后置于孵箱观察。

细菌平板计数法：

首先我们分别在N个EP管内加入900微升无菌N.S或者缓冲液拟做稀释液，从标本中取出100微升加到第一个EP内，则第一EP管内细菌浓度为标本的1/10；同法，从第一EP中取出100微升加到第二个EP内，则第二EP管内细菌浓度为标本的1/100。依此类推，第N个管为原标本浓度的1/10n,再取合适的梯度100微升铺皿。培养后，如平皿上菌落数为10-200就比较正确、容易计数，那你选择的浓度梯度就比较好，记数比较可靠！数记出来了，可以倒推出你标本的浓度。

如某标本未知浓度 其第三个梯度的计数为了18，则标本每毫升的细菌浓度=18×10（因为你铺皿只用了第三管1/10）×100×10

将一定量的菌液接种在平板表面这是一种简化的计数方法，两者区别在操作上一个麻烦，一个简单，在判断结果上接种平板表面的，菌量多时没有稀释好容易产生菌落融合在一起生长不易分离现象，致使读数困难和不准。混合在一起则菌细胞分布较均匀，结果易观察，当然，两种方法都要对配制好的菌液进行系列稀释，对不同稀释度的菌悬液进行菌落计数，然后乘以稀释倍数即可得实际菌细胞数量，一般以生长100-300个菌落平板的为佳。

编者注：平板计数更加快捷方便一些，而且，数菌的时候更加方便，如果用混匀计数......数菌的时候可以看得你眼花！通常，我们认为，细菌数量在30-300之间是较准确的，在300以上容易涂布不均使细菌混在一起，30以下稀释的时候误差太大。

编者经验：涂布的时候不要嫌累，多涂一会不会有什么坏处，否则，细菌涂布不均就.......
 

(责任编辑：大汉昆仑王)