对幽门螺杆菌有效中西药物的筛选

 

对幽门螺杆菌有效中西药物的筛选

　　在中药方剂胃忧愈治疗消化性溃疡及伴发幽门螺杆菌（Hp）相关性 慢性胃炎 取得良好效果，Hp清除率50％的基础上，根据中医理论和临床实践，参照中药研究成果，应用药敏试验方法对清热解毒及可能具有抗菌作用的20种中药进行筛选，选择对Hp有较好抑制作用者制成灭Hp胶囊。选用14种对Hp有效抗生素及各种药物联合进行药敏试验，进一步筛选疗更佳的联合用药组合方案。

1　材料和方法

1.1　材料

　　Hp菌株分离培养：Hp菌株来自本院胃镜室胃镜检查的 慢性胃炎 和消化性溃疡患者幽门前区粘膜组织钳取物，直接接种于空肠弯曲菌选择性培养基（英格兰Unipath公司产品）上，置微氧环境，37℃培养72h，检查菌落，革兰染色为阴性杆菌，尿素酶、氧化酶、过氧化氢酶试验阳性。选择从不同患者胃内分离的菌株，生长良好者8株做为药敏试验菌。

1.2　方法

每种药物或联合用革均进行8株从不同个体分离的Hp菌株的敏感试验。平均抑菌直径10mm以内为轻度敏感；10mm～20mm为中度敏感；20mm以上为高度敏感。

1.2.1　有效西药的筛选

将四环素、痢特灵、庆大霉素、红霉素、甲硝唑、De－Nol、羟氨苄青霉素、氟呱酸、氟嗪酸，氨苄青霉素、先锋必素、复达新、西力欣、菌必治14种药物各0.1g，加无菌蒸馏水1ml制成10％溶液。将直径5mm药敏纸片浸入药液，浸透后取出，分别装于干燥无菌瓶内置37℃孵箱内烘干，灭菌后分别贴于已接种好Hp菌的血琼脂平板上，置微氧环境，37℃培养48h，测量抑菌直径。将上述药液0.1ml分别和De-Nol或（和）甲硝唑0.1ml混合，再将上述14种药物按排列组合方法组成3种不同药物的联合，取各种不同的药液各0.1ml相混合，按上述方法进行药敏试验。

1.2.2　有效中药的筛选

　　将黄连、黄柏、白芍、大黄、连翘、黄芩、白花蛇舌草、乌梅、双花、赤芍、三七、公英、地丁、丹皮、生地、水牛角、川朴、丹参、人参、龙胆草各10g，加水100ml，煎至10ml。将“胃忧愈”5倍浓缩粉剂，锡美散各10g加水50ml，加热煎至10ml，双层纱布过滤，为100％（g/v）原汁。将直径5mm灭菌药敏纸片，无菌操作在高压灭菌后的中药原汁中完全浸泡，浸透后取出，然后贴于已接种好Hp菌的血琼脂平板上，置微氧环境，37℃培养48h，检测抑菌直径。将 人参 ，丹参，“胃忧愈”原汁0.5ml分别与以上单味中药原汁0.5ml混合。再将20种单味中药按排列组合方法，组合成三种药物的混合液（每种0.3ml）进行试验。

2　结果

　　西药敏感试验中所选药物在培养基上的中度和高度敏感（表1）。四环素、痢特灵、甲硝唑、De－Nol先锋必素为中度敏感；庆大霉素、氨苄青霉素、氟呱酸、红霉素、羟氨苄青霉素、氟嗪酸、复达新、西力欣，菌必治为高度敏感。本文所选药物中，De－Nol与甲硝唑单一抑菌直径为19.88mm±1.21mm，14.50mm±0.74mm，与四环素（21.25±0.78），痢特灵（21.75±1.04），先锋必素（17.63±1.04），羟氨苄青霉素（23.75±0.96）联合则非常显著的增加这几种药物的抑菌作用，较单一用药差异非常显著（ P ＜0.01）。也显著增加氨苄青霉素（25.50±1.82）、氟呱酸（25.13±1.47）、西力欣（24.25±1.12）、菌必治（26.13±1.76）的抑菌作用（ P ＜0.05）。De－Nol和甲硝唑联合再与所有单一药物联合均非常显著的增加抑菌作用（ P ＜0.01或 P ＜0.05)。联合用药较单一用药抑菌作用增强，这可能与抗生素的作用方式不同而产生协同作用有关。也是克服Hp对某种药物原发耐药的有效方法。三种药物排列组合药物效果，与含De－Nol和甲硝唑的三联药敏效果相比，其效果未见更佳者。另因De－Nol具有杀灭Hp感染仍应采用含De－Nol和甲硝唑的联合治疗。复达新、西力欣、菌必治对Hp抑制作用强，在培养基上单一抑菌效果与其他药物的三联抑菌效果相似，今后如在临床治疗中也达到与三联用药相似的疗效，也可成为一类较好的抗Hp药物。

表1　西药敏感试验结果　　　　　（抑菌直径mm，x± s ）

药物

单一药物

与De－Nol联合

与甲硝唑联合

与De－Nol+甲硝唑联合

四环素

16.38±0.43

21.25±0.72 ^b

18.25±1.04 ^b

23.13±0.96 ^b

痢特灵

12.25±1.26

21.75±1.04 ^b

16.63±0.16 ^b

21.63±1.22 ^b

庆大霉素

21.13±0.94

21.88±1.64

22.13±0.75

24.50±1.27 ^b

甲硝唑

14.50±0.74

20.63±1.57 ^b

De－Nol

19.88±1.21

21.50±0.48 ^b

氟呱酸

24.25±1.24

25.13±1.47

23.63±1.67

25.88±2.14 ^b

红霉素

20.50±0.96

21.75±1.05

20.88±1.52

22.63±1.76 ^b

羟氨苄

21.25±0.80

23.75±0.96 ^b

22.63±1.62 ^a

26.38±2.03 ^b

先锋必素

15.38±1.25

17.62±1.64

17.50±1.14 ^b

20.38±1.16 ^b

氟嗪酸

23.38±1.52

22.38±0.74

22.13±1.37

25.13±0.84 ^b

氨苄清

21.33±0.32

22.13±0.63

25.50±1.82 ^b

24.50±2.14 ^b

复达新

25.2