肌梭传入冲动的观察
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[实验目的]
观察肌肉被动牵拉张力的变化(肌肉的负荷量变化)与肌梭感受器的传入冲动之间的关系。
[实验原理]
肌梭是骨骼肌的本体感受器。当肌肉受到牵拉或在梭内肌纤维收缩时都可产生传入冲动,经中枢反射性引起同一块肌肉的梭外肌收缩。此反射称为牵张反射或本体反射。在一定的范围内每根传入纤维发放冲动的频率与肌肉被动牵拉张力的大小呈正相关。
[实验对象]
蟾蜍。
[实验药品]
任氏液、
[
仪器
与器械]
计算机生物信号采集处理系统(或示波器、前置放大器、监听器)、引导电极、神经肌肉浴槽(缝匠肌浴槽)、蛙类手术器械、法码、万能支架。
[实验方法与步骤]
1.制备坐骨神经-缝匠肌标本
(1) 按常规损毁蟾蜍脑和脊髓,剪去蟾蜍的前半身、内脏,剥去皮肤、分离两后肢。
(2)取一侧后肢,背位固定于蛙板上,找到起自耻骨外侧,止于胫骨上端内侧的缝匠肌。
(3)用玻璃分针沿缝匠肌内侧缘小心划开肌内、外侧肌膜(切勿过深)。在该肌近耻骨端剪下一小片耻骨,用镊子轻轻提起骨片,从前至后分离缝匠肌。当分离到肌肉下1/3处时,(轻轻提起肌肉的游离端,面对灯光)可见一支细神经从肌肉的内侧缘进入肌肉,然后分为两个小分支。
(4)沿此细小神经向中枢端追踪,分离坐骨神经至脊髓,连带一小块椎骨剪下。然后结扎缝匠肌胫骨端肌腱并剪断,将神经与缝匠肌标本一起游离出来(图12.4-1),置于任氏液中备用。
2.
仪器
的连接
按图12.4-2将缝匠肌耻骨端的结扎线固定在标本浴槽内,有机玻璃斜板下端的小桩上,使缝匠肌的内侧面(有神经的一面)朝上,将胫骨端结扎线通 过一滑轮与砝码相连。浴槽内使任氏液将部分标本浸泡,溶液接地(也可使整个标本进行屏蔽)。神经置于引导电极上。
(1)使用计算机
生物
信号采集处理系统: 将引导电极导线连到系统的第CH1通道,第CH2通道做CH1通道的积分。其参数可设为,增益:200;高频滤波:10 kHz;时间常数:0.01~0.05 s,采样频率:2000~5000。
(2)若使用前置放大器、示波器系统,可将前置放大器高频滤波设为10 kHz,增益为1000,输入选择为0.001 s,示波器灵敏度为50 μV/cm。
3、实验项目
(1)观察肌梭的自发放电:观察并记录缝匠不加负荷时,自发的基础放电情况(即传入神经冲动)。
(2)观察不同负荷时的传入冲动:在滑轮上悬挂不同重量的砝码(通常用l~10 g)时,观察缝匠肌放电的变化。每次负重间隔2 min,统计每次负重后10 s的传入冲动数。
(3)负重牵拉的速度对传入冲动的影响:分别把5 g的负重以快(即时)、中(约3 s)、慢(约6 s)三种速度加于肌肉上。观察缝匠肌放电的变化。
(4)持续负重时的传入冲动:在砝码盘中加5g砝码持续牵拉肌肉。从开始负重时起,每10 s统计一次传入冲动数,直至1 min。
[注意事项]
1.制备标本时要细心,分离神经和缝匠肌时不要夹捏或过度牵拉神经和肌腱,以免损伤神经或肌肉。
2.整个实验过程中,置于任氏液外的肌肉也要用任氏液浸润,以防止标本干燥。
3.标本要屏蔽好。
4.结果观察后,要及时取下砝码,以防过度牵拉而致标本损伤,两个相邻实验项目之间应间隔2 min。
[实验结果]
1. 以负荷重量为横坐标,增加负荷后10 s 的脉冲数· s-1为纵坐标,做放电频率与负荷的关系曲线。
2. 以负荷重量的对数为横坐标,增加负荷后10 s 的脉冲数· s-1为纵坐标,做放电频率与负荷的关系曲线。
3. 比较这两条曲线的线性关系。