神经干不应期测定

模拟实验4 神经干不应期测定

【目的】

了解蛙类坐骨神经干产生动作电位后其兴奋性的规律性变化。学习绝对不应期和相对不应期的测定方法。

【原理】

神经组织和其他可兴奋组织一样，在接受一次刺激产生兴奋以后，其兴奋性将会发生规律性的变化，依次经过绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，然后再回到正常的兴奋水平。采用双脉冲刺激。可先给予一个中等强度的阈上刺激，在神经发生兴奋后，按不同时间间隔给予第二个刺激，通过调节两刺激脉冲间隔，可测得坐骨神经的绝对不应期和相对不应期。将两刺激脉冲间隔由最小逐渐增大时，开始只有第一个刺激脉冲刺激产生动作电位(action potential, AP)，第二个刺激脉冲刺激不产生AP，当两刺激脉冲间隔达到一定值时，此时第二个刺激脉冲刚好能引起一极小的AP，这时两刺激脉冲间隔即为绝对不应期。继续增大刺激脉冲间隔，这时由第二个刺激脉冲刺激产生的AP逐渐增大，当两刺激间隔达到某一值时，此时由第二个刺激脉冲刺激产生的AP，其振幅刚好和由第一个刺激产生的AP相同，这时两刺激脉冲间隔即为相对不应期。继续增大刺激间隔，此时由两刺激脉冲产生的AP将始终保持完全一致。

【预习要求】

与模拟实验3相同

【材料】 蟾蜍或蛙；标本屏蔽盒、任氏液、微机生物信号采集处理系统。

【方法】

1．系统连接和 仪器 参数设置

（1）RM6240系统：点击“实验”菜单，选择“肌肉神经”或“生理科学实验项目”菜单中的“神经干兴奋不应期的测定”或“神经干兴奋不应期的自动测定”项目。系统进入该实验信号记录状态。 仪器 参数：1通道时间常数0.02s、滤波频率1KHz、灵敏度4mV，采样频率80KHz，扫描速度1ms/div。双刺激激模式，最大刺激强度，刺激波宽0.1ms，起始波间隔0.5 ms，延迟2ms，同步触发。

（2）PcLab和MedLab系统：点击“实验”菜单，选择“常用生理学实验”或“文件”菜单“打开配置”中的“神经干动不应期测定”项目。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：2通道放大倍数200、交流耦合（AC）、上限频率10KHz，通道4，记录刺激标记，放大倍数5～50，采样间隔20ms；自动间隔调节刺激方式，最大刺激强度，周期1s，波宽0.1ms，首间隔0.5ms，增量0.2ms，末间隔：30ms，延时1ms；记忆示波方式，刺激器触发。

2．制备蟾蜍坐骨神经干标本（方法同实验3）。

【模拟实验操作方法】

1．模拟实验窗口（图6-2-4） 神经干标本盒内左侧第一对为刺激电极，与刺激器“+、–”输出相连；右侧两对引导电极与示波器输入相连，其中蓝色电极接示波器下线、红色电极接示波器上线；位于刺激电极和引导电极之间的是接地电极，与示波器接地相连。第一、二对引导电极间距为S=10mm。神经干置于标本盒内的电极上。

2．镊子 用于损伤神经干标本。

3．刺激器 设有可调的刺激电压、频率、延时按钮，并有数值显示；另设有“单次、双次”输出切换开关。

4．示波器 设有“扫描速度”调节按钮，以“ms/cm”为单位显示；其下方分别是上、下线的“位移”、“灵敏度”可调按钮，灵敏度以“mv/cm”为单位显示。示波器的按钮调节同步控制屏幕上扫描线的改变。

5．屏幕测量 当鼠标器箭头置于示波器屏幕上时，箭头变为两条垂直交叉的虚线，同时显示该交叉点时间和幅度的值，该值的零点分别是示波器屏幕的左边线和上边线。

6．窗口内容和可操作控件均有提示，窗口提示栏右侧设置“返回”按钮，鼠标点击“返回”按钮，程序返回到模拟实验窗口。

图6-2-4 神经干不应期测定模拟实验窗口

【观察项目】

1．设置刺激器“双次”刺激方式，增加刺激电压至1.5V，动作电位出现在示波器的屏幕上。调节扫描速度为“1ms/cm”。

2．调节刺激器的波间隔，逐渐减小，可见到一前一后两个振幅相同的动作电位。第一个动作电位由条件性刺激引起，第二个动作电位由检验性刺激引起。

3．逐渐减小波间隔，待第二个动作电位振幅降低时，记录下刺激波间隔时间。继续减小波间隔直至第二个动作电位消失，记录此时的刺激波间隔时间。

【实验报告】

1．题目。

2．署名 作者和合作者姓名及单位。

3．结构式摘要（目的，方法，结果，结论）。

4．材料和方法 主要实验材料，离体蟾蜍坐骨神经干标本制备方法简要，仪器装置连接和仪器参数。

5．观察项目 实验观察项目及观察指标。

6．结果 列第2个动作电位出现时的刺激波间隔和第二个动作电位振幅刚开始与第1个动作电位振幅相等时的刺激波间隔和对应的动作电位幅度原始数据表格。用文字和数据逐一描述实验结果。

7．讨论 对实验结果进行分析推理。

8．参考文献。