原理
选用蛙类作为实验对象其离体组织生存条件易于控制，因此常用于生理实验?肌肉是由神经支配的，向神经施加适当刺激，其支配的肌肉会收缩。那么在神经上究竟发生了什么现象?是兴奋一动作电位.生理实验常选用坐骨神经干标本来观察兴奋性、兴奋过程、刺激的一些规律.本实验使用电刺激器?产生一定参数的电刺激，通过刺激电极加到坐骨神经干上，再用引导电极将信号引入示波器的放大器，就可在示波器的屏幕上观察到电刺激后在坐骨神经干上所发生的现象.得以了解阈下刺激、阈刺激、阈上刺激和最大刺激的概念与意义，理解神经干的兴奋性和动作电位之间的关系.
材料与仪器
蛙或蟾蜍
蛙手术器械任氏液
电剌激器示波器标本盒
蛙手术器械任氏液
电剌激器示波器标本盒
步骤
一、坐骨神经干标本的制作
1.破坏脑脊髓取蛙一只，用自来水冲洗干净。左手握住蛙，用食指压住其头部前端使头前俯(图1-1)，右手持探针从相当于枕骨大孔处垂直刺入，将探针向前刺入颅腔。左右搅动捣毁脑组织.然后将探针抽回原处，再向后刺入脊椎管捣毁脊髓。脑脊髓完全破坏的标志是蛙的四肢松软，呼吸消失。否则要依上法再行捣毁
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图1-1破坏蟾蜍脑脊髓的方法
图1-2剪除躯干上部及内脏
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图1-1破坏蟾蜍脑脊髓的方法
图1-2剪除躯干上部及内脏
2.剪除躯干上部及内脏在骶髂关节水平以上0.5-1.0cm处横断脊柱，然后左手握蛙后肢，用拇指压住骶骨.使其头与前肢自然下垂，右手持粗剪刀，沿脊往两侧剪除蛙的一切内脏及头部，注意不要伤及坐骨神经干。（图1-2)。
3.剥皮先剪去肛门周围皮肤，左手垫纸握脊柱断端，右手捏住其上的皮肤边缘，向下剥掉全部后肢的皮肤。然后将标本放在盛有任氏液的培养皿中：注意用力要均匀，手不可接触标本。
4.将手及用过的手术器械洗净
5.分离两腿下肢标本背位置于蛙板上。于两侧坐骨神经干下分别穿线，尽量靠近脊柱结扎。注意此处为腰骶丛，不可遗漏分支,于结扎线的脊柱侧剪下神经，以结扎线为支持线轻轻提起神经，顺其走行方向剪去分支后，将神经干搭在大腿肌肉上.然后持两腿，从背剥剪断两侧犁状肌，沿脊柱两侧向上剪开剔除脊柱。将两侧大腿连同下肢带骨相对扭动、脱关节，于耻骨联合中央剪开两侧大腿.将一腿放回培养皿中。
6.游离坐骨神经用玻璃勾沿神经走行，经犁状肌及其附近的结缔组织、坐骨神经沟，游离神经至掴窝，用支持线轻轻提起神经，顺其走行方向剪去分支。
7.游离胫、腓神经剪开掴窝处深筋膜，再游离神经直到足部。
8.清理标本：将标本标置于大腿肌肉上，用棉花沾任氏液，轻轻擦去神经干上的残余组织。然后将制备好的标本浸入任氏液中数分钟，使其兴奋性稳定后开始实验。
二、仪器的调试相连接
1.调试 示渡器 灵敏度lmV/Div
输入选择AC
扫描速度lmS/Div
输入选择AC
扫描速度lmS/Div
触发选择 外触发，触发输入接刺激器同步输出，在启动刺激器输出时,调节触发
电平至扫描与刺激输出同步为止.
电平至扫描与刺激输出同步为止.
刺激器 刺激方式 连续A
刺激频率 16H:
刺激强度 2V挡，从最小开始.
波 宽 最小
延 迟 使刺激伪迹移到适当处
同步输出 接至示波器外触发输入
延 迟 使刺激伪迹移到适当处
同步输出 接至示波器外触发输入
2.连接按照图1-3连接仪器
三、实验步骤及观察项目
1.准备屏蔽盒用浸有任氏液的棉球擦试所有电极，不要留有水珠，并且擦试内壁，棉球留在盒内， 以形成湿润环境.
2.将神经标本粗端置刺激电极上，细端置记录电极上.
3.按下刺激器的启动钮，调节延迟钮使刺激伪迹移到适当处•如有干扰，检查各仪器接地线。
4.缓慢增大刺激强度，在伪迹后出现的先上(负相波)后下(正相波)的电位即是双相 动作电位.此时的刺激强度为阈强度，高于此强度的刺激为阈上刺激.伪迹至动作位起始的转折处之间的 时间为潜伏时.
图1- 3神经动作电位引导装置示意图
5.增大刺激强度的过程中，伪迹和动作电位均随之加大，但当强度加大到某一程度后(此刺激强度称 为最大刺激)，动作电位就不再增大，而伪迹仍随之加大。这是区别刺激伪迹与动作电位的可靠方法之一。
6.在记录电极两极之间用小摄子夹伤神经干。可见双相动作电位的第二相消失，只留下第一相，即单相动作电位。
7.分别记录双、单相动作电位的幅度、时程、潜伏时,并画出其波形.
注意事项
1.剪断脊柱的位置要正确，不可用力牵拉神经。
2.要经常保持神经标本湿润。
3.神经标本与电极要密切接触，不可折叠，
4.刺激强度不宜过大。
来源：丁香实验
