蟾蜍坐骨神经干复合动作电位特性

目的 应用微机生物信号采集处理系统测定蟾蜍坐骨神经干复合动作电位，观察刺激、神经损伤、药物对神经兴奋性、兴奋传导的影响并探讨其机制

1 材料和方法

1.1 实验动物 蟾蜍（中华蟾蜍指名亚种，Zhuoshan Toad）

1.2 药品 任氏液，氯化钾

1.3 器材 RM6240微机生物信号处理系统（成都 仪器 厂）、神经干标本盒。

1.4 坐骨神经干制备 蟾蜍毁脑脊髓，去上肢和内脏，下肢剥皮浸于任氏液中。蟾蜍下肢背面向上置于蛙板上，剪去尾椎；标本腹面向上，用玻璃分针分离脊柱两侧神经丛，用线在近脊柱处结扎，剪断神经；将神经干从腹面移向背面。标本背面向上固定，从大腿至跟腱分离坐骨神经。坐骨神经标本置任氏液中备用。

1.5 仪器 连接和参数 神经干标本盒两对引导电极分别接微机 生物 信号处理系统1、2通道。 仪器参数：1、2通道时间常数0.02s、滤波频率3KHz、灵敏度5mV，采样频率：100KHz，扫描速度：0.2ms/div。单刺激激方式，刺激幅度1.0V，刺激波宽0.1ms，延迟2ms，同步触发。

1.6 动作电位引导 神经干标本置于标本盒的电极上，神经与电极接触良好，调节刺激电压，记录动作电位。

2 观察

2.1 观察中枢端复合动作电位（compound action potention，CAP） 用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干末梢端，观察中枢端CAP正、负向振幅(amplitude，A)和时程(duration，D)。

2.2 测定双相动作电位（biphasic action potential, BAP） 用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端，测定末梢端BAP正相振幅（Ap 1 ）、正相时程（Dp 1 ）、正相振幅（Ap 2 ）、正相时程（Dp 2 ）。

2.3 传导速度测定 用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端，测定第1和第2对引导电极引导CAP起点的时间差Δt ，根据V＝ S R1- R2- / Δt 计算出AP的传导速度。

2.4 测定单相动作电位（monophasic action potential，MAP） 用镊子夹伤对1对引导电极间的神经干，然后用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端，测定末梢端MAP振幅（Am）和时程（Dm）。

2.5 观察刺激强度与动作电位振幅的关系 刺激波宽0.1ms，刺激电压从0.1V开始， 按步长0.05V增加，刺激电压每增加一次刺激神经干一次，并记录刺激电压和MAP振幅。测定阈刺激（U th ）和最大刺激（U max ）。