细胞表面抗原染色的组织样本制备方法

该方法适用于新鲜和冷冻标本
1.将组织(10-20mm)切成1-2mm的碎片，用缓冲液或培养液浸湿。
2.用1ml缓冲液或培养液预洗Medicon 二遍。
3.将组织和1ml缓冲液或培养液放入到Medicon中，盖上盖子，将Medicon 插入到Medimachine中。
4.降解组织。降解组织的时间长短依赖于组织类型。(参见降解时间表)。
5.用注射器通过 Medicon上的注射器接口将上清吸去。
6.用1ml缓冲液或培养液冲洗Medicon三遍。
7.选择适当大小孔径的Filcon 滤器过滤细胞悬液。(50-mmFilcon 适用 于大 多数组织，如：淋巴结、肿瘤组织、皮肤组织)
8.用1ml缓冲液或培养液冲洗Filcon三遍。
9.250g离心细胞悬液5分钟。
10.用适当的缓冲液或培养液重悬细胞沉淀。
11.若需要，重复3－10步骤。
12.调节细胞浓度至5×105－1×106/ml。
13.用适当浓度的抗体在2－80C与100ml细胞悬液孵育15-30分钟。
14.加2ml 冷的缓冲液或培养液(2－80C), 250g离心5分钟。
15.用缓冲液或培养液重悬细胞沉淀。
16.分析样本。
注意：
1.在处理和接触有感染危险性 生物 样本时，应根据相关法规处理 废液。避免皮肤或粘膜接触样本。勿用嘴移液。
2.该方法虽经验证，但客户需根据自己实验室条件及所处理的组织 类型进行适当调整。
降解时间表：

组织	数量(3-6mm3小块)	脉冲	时间	条件
乳腺组织	3－6	2次	30秒	新鲜或冷冻
膀胱	4－5	2次	20秒	新鲜或冷冻
结肠	3－6	2次	20秒	新鲜或冷冻
胃	4－6	2次	20秒	新鲜或冷冻
胃肿瘤边缘组织	3－6	2次	20秒	新鲜或冷冻
健康组织、胃肿瘤	3－4	2次	20秒	新鲜或冷冻
淋巴结	3－6	2次	15秒	新鲜或冷冻
脾脏	3－6	2次	15秒	新鲜或冷冻
肝脏	3－6	2次	15秒	新鲜或冷冻
卵巢	3－6	2次	30秒	新鲜或冷冻
前列腺	2－3	2次	35秒	新鲜或冷冻
脑组织	3－6	1次	10秒	新鲜或冷冻
肺组织	2－3	2次	30秒	新鲜或冷冻
子宫	3－6	1次	60秒	新鲜或冷冻
皮肤	3－4	1次	45秒	新鲜或冷冻

注意：
该方法虽经验证，但客户需根据自己实验室条件及所处理的组织 类型进行适当调整。