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细胞的显微与亚显微结构观察

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一、相关基础知识
    生物体的一切生命活动,都是以细胞作为基本结构和功能单位来进行的。由于其内在结构和自身表面张力以及外部机械压力,细胞表现具有不同的形态,有圆球形、圆盘形、肾形、多边形、纺锤形等。更重要的是,细胞的形态与其功能密切相关,如红细胞是圆盘形的,有利于其在血管内流动及气体交换;肌细胞按收缩方向是细长的纤维状结构,适于细胞的收缩运动。精子细胞核小,具有一条能运动的尾或鞭毛,以利于其受精过程;植物表皮的保卫细胞是肾形的,似两扇大门、通过对不同细胞形态的观察,可以了解执行不同生理功能的细胞所具有的不同形态,同时还可以认识执行同一功能的细胞具有不同形态,甚至同一种细胞在不同发育时期也呈现不同形态。
    虽然形形色色的细胞组成了千奇百怪的生物世界,但细胞却具有共同的基本结构,即细胞膜、细胞质和细胞核。这些基本结构不是模式化的,只有对具体的细胞进行分析观察,才能正确认识和了解细胞的结构。
    细胞的许多结构在自然状态下几乎是无色的,观察时,必须经过染色步骤。不同的结构与不同的染料有特异性结合,使细胞的不同部位染上不同深度或不同种的颜色,并产生不同的折射率。将细胞内部各部分的构造显示得更清楚。
    一般的生物染料不能穿透细胞膜,只有当细胞被化学试剂固定(杀生)后,膜结构被破坏,染料才能进入细胞内部,附着在被染结构上,显示其染色作用。因此,我们称固定剂有“煤染”作用。但有一些‘活体染料”却能进入活细胞,它们是一些无毒或毒性很小的染色剂。在电化学作用下,染料堆积在细胞中某些特定的位置上,从而染色,如中性红染液泡系、健那绿染线立体等。
    活体染色的方法有体内活染和离体活组织染色两种,体内活染通常是将染料用注射、吸收或吞咽等方法进入生物有机体内进行染色。染色以后,不影响细胞的生命活动,不产生任何理化变化。离体活组织染色是指对已离体的活组织或细胞,置于相对能保持活性的培养液中,使其保持生活状态,再进行染色的方法。
    活体染色的目的是显示活细胞的某些结构,用来研究生活状态下的细胞结构和生理病理状态。
二、实验目的和要求
1、 观察各种组织细胞的切片,注意联系细胞的形态与功能的关系。
2、 学习一些细胞器的超活染色技术,观察植物活细胞内线粒体和液泡系的形态、数量与分布。
三、实验材料与仪器
1、实验材料
    (1)洋葱鳞茎内表皮;
    (2)黄豆根尖;
    (3)动植物组织标本。
2、器材
显微镜  刀片  小剪刀  尖头镊  载玻片  盖玻片  擦镜纸  吸水纸  吸管等
3、 试剂 
中性红(1/3000)  健那绿(0.5%)    蒸馏水
四、实验方法与步骤  生物秀细胞实验论坛交流
1、观察动植物不同组织的切片
    单层扁平上皮;多边形或不规则波浪形.彼此边缘紧密镶嵌。
    单层柱状上皮:核柱形细胞,形状高细,排列紧密,似木栅栏状。
    纤毛上皮:假复层柱状细胞。是由一层不同形状、不同高度的细胞构成。由于细胞大小不同,核不在同一水平位置上,故称为假复层。
    骨骼肌:长圆柱状细胞,内有大量卵圆形细胞核,在肌膜下排成一行,为典型多核细胞。
    平滑肌:长棱形细胞,中央有一圆形核。
    脂肪细胞:圆形细胞,脂滴占据大部分容积。
    软骨细胞:陷在软骨陷窝内的大小不等的圆形细胞。
    人血涂片:观察不同核形的白细胞及双凹面形红细胞。
    鸡血涂片:卵圆形细胞,与人血涂片比较其胞形、核形。
    运动神经元涂片;不规则形细胞,胞体为三角形或多边形。突起由胞体不规则延伸。
    精巢切片;观察精巢内精细胞在不同发育阶段的不同形态。
    洋葱根尖;观察根尖的形态、区分根冠区、分生区、伸长区的不同形态细胞。
2、黄豆根尖细胞液泡系的活染及观察
    取一干净载片,中央滴一滴中性红染液。用刀片将初生的黄豆根尖切一纵切薄片,置染液中,染5-10min。用吸管吸取 蒸馏 水,滴在染液周围,使染液冲淡近无色。此时,轻轻盖一干净载片,用吸水纸吸去多余水分。先观察分生区细胞,寻找染成红色的圆形小泡,即初生液泡。由分生区向伸长区观察,寻找体积增大的液泡。
3、洋葱表皮细胞线粒体的活染及观察
    取一干净载片,中央滴一滴健那绿染液。用尖头镊从洋葱鳞片内撕下一小片表皮,平铺在染料上,勿使有气泡、染5~10min。用吸管吸 蒸馏 水洗去染液,盖片.吸去多余水分。观察胞质中被染成蓝、绿色的颗粒,即线粒体。
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