细胞的显微与亚显微结构观察

一、相关基础知识
    生物体的一切生命活动，都是以细胞作为基本结构和功能单位来进行的。由于其内在结构和自身表面张力以及外部机械压力，细胞表现具有不同的形态，有圆球形、圆盘形、肾形、多边形、纺锤形等。更重要的是，细胞的形态与其功能密切相关，如红细胞是圆盘形的，有利于其在血管内流动及气体交换；肌细胞按收缩方向是细长的纤维状结构，适于细胞的收缩运动。精子细胞核小，具有一条能运动的尾或鞭毛，以利于其受精过程；植物表皮的保卫细胞是肾形的，似两扇大门、通过对不同细胞形态的观察，可以了解执行不同生理功能的细胞所具有的不同形态，同时还可以认识执行同一功能的细胞具有不同形态，甚至同一种细胞在不同发育时期也呈现不同形态。
    虽然形形色色的细胞组成了千奇百怪的生物世界，但细胞却具有共同的基本结构，即细胞膜、细胞质和细胞核。这些基本结构不是模式化的，只有对具体的细胞进行分析观察，才能正确认识和了解细胞的结构。
    细胞的许多结构在自然状态下几乎是无色的，观察时，必须经过染色步骤。不同的结构与不同的染料有特异性结合，使细胞的不同部位染上不同深度或不同种的颜色，并产生不同的折射率。将细胞内部各部分的构造显示得更清楚。
    一般的生物染料不能穿透细胞膜，只有当细胞被化学试剂固定（杀生）后，膜结构被破坏，染料才能进入细胞内部，附着在被染结构上，显示其染色作用。因此，我们称固定剂有“煤染”作用。但有一些‘活体染料”却能进入活细胞，它们是一些无毒或毒性很小的染色剂。在电化学作用下，染料堆积在细胞中某些特定的位置上，从而染色，如中性红染液泡系、健那绿染线立体等。
    活体染色的方法有体内活染和离体活组织染色两种，体内活染通常是将染料用注射、吸收或吞咽等方法进入生物有机体内进行染色。染色以后，不影响细胞的生命活动，不产生任何理化变化。离体活组织染色是指对已离体的活组织或细胞，置于相对能保持活性的培养液中，使其保持生活状态，再进行染色的方法。
    活体染色的目的是显示活细胞的某些结构，用来研究生活状态下的细胞结构和生理病理状态。
二、实验目的和要求
1、 观察各种组织细胞的切片，注意联系细胞的形态与功能的关系。
2、 学习一些细胞器的超活染色技术，观察植物活细胞内线粒体和液泡系的形态、数量与分布。
三、实验材料与仪器
1、实验材料
    （1）洋葱鳞茎内表皮；
    （2）黄豆根尖；
    （3）动植物组织标本。
2、器材
显微镜  刀片  小剪刀  尖头镊  载玻片  盖玻片  擦镜纸  吸水纸  吸管等
3、 试剂 
中性红（1／3000）  健那绿（0.5％）    蒸馏水
四、实验方法与步骤  生物秀细胞实验论坛交流
1、观察动植物不同组织的切片
    单层扁平上皮；多边形或不规则波浪形．彼此边缘紧密镶嵌。
    单层柱状上皮：核柱形细胞，形状高细，排列紧密，似木栅栏状。
    纤毛上皮：假复层柱状细胞。是由一层不同形状、不同高度的细胞构成。由于细胞大小不同，核不在同一水平位置上，故称为假复层。
    骨骼肌：长圆柱状细胞，内有大量卵圆形细胞核，在肌膜下排成一行，为典型多核细胞。
    平滑肌：长棱形细胞，中央有一圆形核。
    脂肪细胞：圆形细胞，脂滴占据大部分容积。
    软骨细胞：陷在软骨陷窝内的大小不等的圆形细胞。
    人血涂片：观察不同核形的白细胞及双凹面形红细胞。
    鸡血涂片：卵圆形细胞，与人血涂片比较其胞形、核形。
    运动神经元涂片；不规则形细胞，胞体为三角形或多边形。突起由胞体不规则延伸。
    精巢切片；观察精巢内精细胞在不同发育阶段的不同形态。
    洋葱根尖；观察根尖的形态、区分根冠区、分生区、伸长区的不同形态细胞。
2、黄豆根尖细胞液泡系的活染及观察
    取一干净载片，中央滴一滴中性红染液。用刀片将初生的黄豆根尖切一纵切薄片，置染液中，染5-10min。用吸管吸取 蒸馏 水，滴在染液周围，使染液冲淡近无色。此时，轻轻盖一干净载片，用吸水纸吸去多余水分。先观察分生区细胞，寻找染成红色的圆形小泡，即初生液泡。由分生区向伸长区观察，寻找体积增大的液泡。
3、洋葱表皮细胞线粒体的活染及观察
    取一干净载片，中央滴一滴健那绿染液。用尖头镊从洋葱鳞片内撕下一小片表皮，平铺在染料上，勿使有气泡、染5～10min。用吸管吸 蒸馏 水洗去染液，盖片．吸去多余水分。观察胞质中被染成蓝、绿色的颗粒，即线粒体。