杂交瘤技术

 

    杂交瘤技术的创建与以下两项技术的发展密切相关。一是细胞融合技术的发展。1965年Harris最先成功地用仙台病毒将体外培养的Hela细胞和小鼠艾氏腹腔积液癌细胞融合成一个杂交细胞，表明异种动物细胞可融合成具有双方亲代细胞特性的杂种细胞；二是骨髓瘤细胞株的建立。同年Sachs最先用矿物油刺激BALB／c小鼠诱生骨髓瘤，且可在体外培养，建立多发性骨髓瘤细胞系。细胞融合技术的发展和骨髓瘤细胞株的建立为B细胞杂交瘤技术的创建提供了条件。1975年Koehler和Milstein合作，选择经绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞和在体外培养的能持续繁殖的小鼠骨髓瘤细胞融合，最终获得具有两种亲本细胞各自特点的杂交细胞，建立了第一个B细胞杂交瘤细胞株，它既能分泌特异性抗绵羊红细胞抗体，又能在体外培养永久传代。他们在Nature杂志上联名发表的题为“分泌预定特异性抗体的融合细胞持续培养”的著名论文，宣告单克隆抗体的诞生，该项成果荣获1984年度诺贝尔医学奖和生理奖。近年来，随着基因工程抗体的问世，使其临床研究与应用获重大的突破。迄今，全世界已经研制成数以千计的单克隆抗体，在实验研究和疾病的诊断、治疗、预防等方面发挥巨大的作用。

 

    杂交瘤技术的原理是利用聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)为细胞融合剂，使免疫的小鼠脾细胞与具有体外长期繁殖能力的小鼠骨髓瘤细胞融为一体，在HAT选择性培养基的作用下，只让融合成功的杂交瘤细胞生长，经过反复的免疫学检测、筛选和单个 细胞培养 (克隆化)，最终获得既能产生所需单克隆 抗体 ，又能长期繁殖的杂交瘤细胞系。将这种杂交瘤细胞扩大培养，接种于小鼠腹腔，在小鼠腹腔积液中即可得到高效价的单克隆 抗体 。